ARP家族對染色質(zhì)結(jié)構(gòu)和DNA損傷修復的機制研究.pdf

1、染色質(zhì)是遺傳物質(zhì)的載體，其結(jié)構(gòu)對真核基因的轉(zhuǎn)錄活性具有重要影響。作為染色質(zhì)結(jié)構(gòu)基本組成單位的核小體，通過組裝和排列影響染色質(zhì)構(gòu)型進而對基因表達進行調(diào)控，因此對影響核小體組裝排列機制的研究有助于我們揭開一系列與基因轉(zhuǎn)錄相關(guān)生命活動的神秘面紗。此外，DNA損傷修復應答機制的研究也具有重要意義，作為遺傳信息載體的DNA對生物體的重要性不言而喻。DNA的損傷會破壞基因組的穩(wěn)定性和完整性，進而影響細胞的正常生命活動，從而導致嚴重疾病的發(fā)生，所以對

2、DNA損傷修復機制的研究意義重大并刻不容緩。
　　本課題選取釀酒酵母作為研究模式生物，對細胞核內(nèi)肌動蛋白相關(guān)蛋白(ARP)家族參與染色質(zhì)結(jié)構(gòu)和DNA損傷修復的過程進行了初步的研究。我們首先成功構(gòu)建了一系列實驗所需突變體菌株，接著進行HU和MMS條件下細胞生長狀態(tài)分析，發(fā)現(xiàn)核內(nèi)ARP蛋白家族參與了DNA合成與DNA損傷修復應答。之后我們分別制備了核內(nèi)ARP蛋白家族的ChIP DNA、RNA和單核小體樣品并進行高通量測序。對核小體數(shù)據(jù)

3、的初期分析結(jié)果與表型一致表明核內(nèi)ARP家族參與影響了染色質(zhì)結(jié)構(gòu)。
　　研究表明Arp6，Arp8等與H2A.Z相互作用參與了染色質(zhì)結(jié)構(gòu)改變、基因表達調(diào)控和DNA損傷修復應答，而其具體分子機制還有待揭示。我們擬通過對Htz1參與脂肪酸脅迫應答進行研究進一步解析Htz1的功能。結(jié)果表明在脂肪酸脅迫條件下三羧酸循環(huán)相關(guān)基因表達被激活而核糖體相關(guān)基因表達被抑制。更重要的是我們發(fā)現(xiàn)Htz1可作為脂肪酸脅迫的感應器。在遭受脂肪酸脅迫時Htz1