精子染色質(zhì)結(jié)構(gòu)檢測在男性不育診斷和治療中的應(yīng)用研究.pdf

1、目的：精子染色質(zhì)是父方來源的遺傳信息的載體，染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的完整性是正常受精、胚胎發(fā)育與妊娠的前提條件。本研究的目的是，通過明確精子染色質(zhì)結(jié)構(gòu)參數(shù)與精液常規(guī)參數(shù)、男性不育、IVF—ET結(jié)局以及精液冷凍—復(fù)蘇之間的關(guān)系，來評估精子染色質(zhì)結(jié)構(gòu)檢測在男性不育診斷及治療中的應(yīng)用價(jià)值。 方法：實(shí)驗(yàn)分為三部分進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)一，收集36例不育男性(其中精液常規(guī)參數(shù)正常和異?；颊吒?8例)和18例健康對照的精液，采用TUNEL技術(shù)測定精子DNA碎片化水

2、平，CMA3染色技術(shù)測定精子染色質(zhì)包裝質(zhì)量，對比不育男性與健康對照的差異，并分析精子染色質(zhì)結(jié)構(gòu)參數(shù)與精液常規(guī)參數(shù)的相關(guān)性；實(shí)驗(yàn)二，嚴(yán)格控制非精子因素的情況下，收集136例不育患者進(jìn)行IVF—ET后剩余的精子，用SCD技術(shù)測定精子DNA碎片化水平，CMA3染色測定精子染色質(zhì)包裝質(zhì)量，分析SCD陽性率和CMA3陽性率與IVF—ET后的受精率、優(yōu)質(zhì)胚胎率的相關(guān)性，并比較精子染色質(zhì)結(jié)構(gòu)參數(shù)在IVF—ET后獲得妊娠與未獲得妊娠的患者之間的差異；實(shí)

3、驗(yàn)三，采集人類精子庫的捐精志愿者精液標(biāo)本22例，用TUNEL技術(shù)測定冷凍—復(fù)蘇前后的精子DNA碎片化水平，比較冷凍前后精子質(zhì)量參數(shù)的差異，并分析精子冷凍損傷與冷凍前精子參數(shù)之間的關(guān)系。 結(jié)果：不育患者精子TUNEL陽性率和CMA3陽性率均顯著高于健康對照組，精子染色質(zhì)結(jié)構(gòu)參數(shù)與精液常規(guī)參數(shù)之間具有顯著的相關(guān)性。精子SCD陽性率和CMA3陽性率均與IVF受精率呈顯著負(fù)相關(guān)，對早期胚胎發(fā)育無直接影響。獲得臨床妊娠的患者，精子SCD陽

4、性率和CMA3陽性率都顯著低于未獲得臨床妊娠的患者。冷凍—復(fù)蘇后的精子TUNEL陽性率顯著高于冷凍前，前向運(yùn)動百分率顯著低于冷凍前。冷凍造成的精子DNA損傷的程度與冷凍前的各項(xiàng)參數(shù)之間未見顯著相關(guān)性。 結(jié)論：不育男性的精子染色質(zhì)結(jié)構(gòu)缺陷比健康男性更為嚴(yán)重，精子染色質(zhì)結(jié)構(gòu)異常是男性不育的一個(gè)原因，并可對IVF—ET治療的受精率及妊娠結(jié)局造成不良影響，導(dǎo)致輔助生殖治療的失敗。精液冷凍—復(fù)蘇可損害精子DNA完整性，但在健康的捐精者，冷