樹突狀細(xì)胞在實(shí)驗(yàn)性末端回腸炎發(fā)病中的變化及其意義.pdf

1、目的：探討樹突狀細(xì)胞（dendritic cell，DC）在實(shí)驗(yàn)性末端回腸炎發(fā)病中的變化及其意義。
　　方法：120只雄性SD大鼠，被隨機(jī)分為Z（造模組）、F（縫線組）、D（對照組）三組，每組40只。上述三組予以不同的實(shí)驗(yàn)處理，Z組將末端回腸、盲腸行側(cè)側(cè)吻合術(shù)，形成盲腸-末端回腸反流模型，F(xiàn)組于末端回腸、盲腸處僅作縫線手術(shù)，制造與Z組相似的損傷，D組僅行常規(guī)腹腔麻醉。術(shù)后2周、8周每組隨機(jī)抽取20只SD大鼠，脫頸處死，取末端回腸組

2、織肉眼觀察并進(jìn)行炎癥評分，蘇木精-伊紅(hematoxylin-eosinstaining,HE)染色，觀察病理學(xué)變化及予以鏡下炎癥評分，免疫組化檢測CD1a、CD83的表達(dá)情況并分析，透射電子顯微鏡(Transmission Electron Microscopy,TEM)下觀察DC的形態(tài)特征。
　　結(jié)果：
　　1.末端回腸組織肉眼觀察及鏡下觀察術(shù)后2周，Z組、F組均有不同程度的急性炎癥改變，黏膜充血水腫，可見中性粒細(xì)胞浸

3、潤，兩組炎癥評分均較D組高（P<0.05）；術(shù)后8周，Z組可見典型慢性炎癥改變，炎癥累及黏膜層及黏膜下層，腸壁增厚，絨毛結(jié)構(gòu)不清， 腺體減少或消失，淋巴濾泡增生，淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞浸潤。而F組、D組未見明顯炎性改變，Z炎癥評分較F組、D組高(P<0.05)。
　　2.透射電子顯微鏡下觀察DC的形態(tài) D組2周、8周時可見一些DC，細(xì)胞體積較小、近似圓型，突起短少，胞質(zhì)密度低，細(xì)胞器數(shù)目較少，含較多囊泡狀結(jié)構(gòu)，胞核外形不規(guī)則，

4、表面可見凹陷，染色質(zhì)淡，可見核仁，具有未成熟DC的形態(tài)特征。Z組2周、8周時DC數(shù)目明顯增多，細(xì)胞體較大，形狀不規(guī)則，細(xì)胞表面樹枝樣突起增多、增長，胞漿內(nèi)可見大量的細(xì)胞器，囊泡狀結(jié)構(gòu)少，胞核形態(tài)多樣，位于細(xì)胞的一側(cè)，可見清晰的核膜，胞核異染色質(zhì)增粗，具有成熟DC的形態(tài)特征。
　　3.末端回腸組織CD1a的表達(dá)水平免疫組化染色顯示三組SD大鼠末端回腸組織中CD1a于黏膜及黏膜下層均陽性表達(dá)。術(shù)后2周，三組SD大鼠末端回腸組織CD1a

5、陽性細(xì)胞浸潤密度進(jìn)行比較，總體來說差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），Z組最高，F(xiàn)組其次,D組最低；術(shù)后8周，Z組CD1a陽性細(xì)胞浸潤密度最高，較F組、D組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），而F組較D組，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。Z組2、8周時，炎癥評分1-4分組、4-8分組、8-13分組三組黏膜中CD1a陽性細(xì)胞浸潤密度進(jìn)行比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05)，以8-13分組最高，且CD1a的表達(dá)水平與炎癥程度呈正相關(guān)

6、。
　　4.末端回腸組織CD83的表達(dá)水平免疫組化染色顯示Z組、F 組SD大鼠CD83陽性表達(dá)，呈棕黃色，主要位于黏膜及膜下層，D組弱表達(dá)或不表達(dá)。術(shù)后2周，Z組、F組CD83陽性細(xì)胞數(shù)明顯增多，上述兩組CD83陽性細(xì)胞浸潤密度較D組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01），以Z組最高；術(shù)后8周，Z組CD83陽性細(xì)胞浸潤密度最高，較F組、D組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），而F組較D組，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.

7、05）。Z組2周、8周時，炎癥評分1-4分組、4-8分組、8-13分組三組黏膜中CD83的陽性細(xì)胞浸潤密度進(jìn)行比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05)，均顯著高于D組，且CD83的表達(dá)水平與炎癥程度呈正相關(guān)。
　　結(jié)論：
　　1.ETI中DC的形態(tài)、結(jié)構(gòu)由未成熟型向成熟型轉(zhuǎn)變，可能與抗原攝取、呈遞功能有關(guān)。
　　2.ETI黏膜中CD1a+DC、CD83+DC明顯增多，且與炎癥程度呈正相關(guān)。
　　3.DC形態(tài)、結(jié)構(gòu)