富硒女貞子緩解奶牛熱應(yīng)激效果的研究.pdf

1、熱應(yīng)激是一種主要由高溫高濕引起的全身適應(yīng)性綜合征，中獸醫(yī)病因病理及辯證診治的基礎(chǔ)理論認為，熱應(yīng)激是由于高熱邪氣所致的陽盛陰虛病癥，女貞子是木犀科植物女貞的果實，具有清虛熱，補肝益腎的功效。本課題組前期研究結(jié)果顯示通過生物富集硒的女貞子能有效降低急性熱應(yīng)激小鼠的死亡率，緩解熱應(yīng)激造成的小鼠肝損傷。可以有效的提高熱應(yīng)激奶山羊的免疫力，緩解熱應(yīng)激奶山羊產(chǎn)奶量的下降問題，并研究了富硒女貞子三種有效成分對奶山羊外周血淋巴細胞增殖活性、細胞因子分泌

2、的影響。因此，我們對富硒女貞子進行了抗奶牛熱應(yīng)激的研究，通過富硒女貞子對奶牛的抗熱應(yīng)激療效試驗，觀察其對奶牛生產(chǎn)性能、血液學和血清生化指標的影響及提取富硒女貞子蛋白觀察其對奶牛外周血淋巴細胞增殖活性和細胞因子分泌的影響。在前人的基礎(chǔ)上進行富硒女貞子抗奶牛熱應(yīng)激的效果、作用機制及其有效部位群的探討。
　　試驗一富硒女貞子對熱應(yīng)激奶牛的影響
　　為了探索富硒女貞子對奶牛熱應(yīng)激的干預作用，本試驗在2014年7月21日到9月1日期間

3、，選用50頭年齡、胎次、產(chǎn)奶量相近的中國荷斯坦奶牛隨機分為5組，其中HS組、MS組和LS組分別按照每天60g/頭、40g/頭、20g/頭劑量的富硒女貞子拌飼，P組按每天40g/頭普通女貞子拌飼，C組為熱應(yīng)激對照組常規(guī)飼養(yǎng)。通過試驗期間每旬前3天下午15時1次/天給藥，來觀察富硒女貞子對熱應(yīng)激奶牛生產(chǎn)性能、血液學和血清生化指標的影響。結(jié)果顯示:用藥后，MS組的ACTH水平和皮質(zhì)醇水平顯著下降(P＜0.05)，T3恢復到正常水平。HS組、M

4、S組的HSP70水平顯著升高(P＜0.05)，MS組和P組的SOD和GSH-PX水平顯著提高(P＜0.05)。HS組MS組和P組的IFN-γ水平顯著提高(P＜0.05)，其中MS組差異極顯著(P＜0.01)。富硒女貞子3個組的奶產(chǎn)量較熱應(yīng)激前（5月1日到6月15日）分別下降了23.91％、28.87％、25.23％，與P組和C組分別下降的39.19％和36.55％有顯著差異(P＜0.05); MS組和P組的乳蛋白含量較熱應(yīng)激前也有顯著提

5、高(P＜0.05)。表明富硒女貞子可以有效的改善熱應(yīng)激期間奶牛的內(nèi)分泌、抗氧化能力、免疫能力，促進HSP70分泌，從而在生產(chǎn)性能方面，富硒女貞子可以有效的緩解熱應(yīng)激期間奶牛產(chǎn)奶量的下降，并提高乳品質(zhì)。
　　試驗二富硒女貞子蛋白對奶牛外周血淋巴細胞增殖活性、細胞因子分泌的影響
　　通過提取富硒女貞子蛋白和普通女貞子蛋白，并使用制備液相色譜從粗提的富硒女貞子蛋白中提取硒蛋白餾分(SLLPF)，采用MTT和ELISA法檢測這三種蛋

6、白質(zhì)對奶牛外周血淋巴細胞(peripheral blood lymphocyte; PBL)增殖活性和多種細胞因子分泌功能的影響，來探索富硒女貞子抗奶牛熱應(yīng)激的有效成分或/和有效部位群。試驗結(jié)果表明，三種蛋白均可促進ConA刺激下的奶牛外周血淋巴細胞增殖，效果隨濃度的增加而上升，富硒女貞子蛋白與硒蛋白餾分在濃度高于50μg/ml時較對照組效果顯著(P＜0.05)，在濃度高于400μg/ml時，普通女貞子蛋白較對照組差異顯著(P＜0.05

7、)，富硒女貞子蛋白和硒蛋白餾分較對照組差異極顯著(P＜0.01)，且富硒女貞子蛋白在各個濃度均優(yōu)于普通女貞子蛋白，差異顯著(P＜0.05)。富硒女貞子蛋白組和SLLPF組的的IL-2、IL4、IL-6、IFN-γ水平均顯著高于對照組(P＜0.05)，其中富硒女貞子蛋白的IL-4和SLLPF組的IL-6水平較對照組有極顯著上升(P＜0.01)，普通女貞子蛋白的IL-4和IFN-γ較對照組也有顯著提高(P＜0.05)。說明富硒女貞子蛋白可以

8、進一步提高奶牛外周血淋巴細胞細胞活性，并調(diào)升細胞因子的分泌。同時提示富硒女貞子蛋白中的硒蛋白可能是富硒女貞子的有效部位群之一。
　　結(jié)論:富硒女貞子按每頭每天20g～60g的劑量拌料飼喂可以有效的緩解奶牛熱應(yīng)激導致的產(chǎn)奶量下降，以每頭每天40g的作用效果為佳，并且作用效果優(yōu)于普通女貞子。其作用機制是通過HPA軸來調(diào)節(jié)與熱應(yīng)激相關(guān)的ACTH、COR等激素，提高熱應(yīng)激期間奶牛的免疫力，增強抗氧化活性，調(diào)節(jié)HSP70等熱應(yīng)激休克蛋白表達