富硒女貞子緩解奶牛熱應(yīng)激效果的研究.pdf

1、熱應(yīng)激是一種主要由高溫高濕引起的全身適應(yīng)性綜合征，中獸醫(yī)病因病理及辯證診治的基礎(chǔ)理論認(rèn)為，熱應(yīng)激是由于高熱邪氣所致的陽(yáng)盛陰虛病癥，女貞子是木犀科植物女貞的果實(shí)，具有清虛熱，補(bǔ)肝益腎的功效。本課題組前期研究結(jié)果顯示通過(guò)生物富集硒的女貞子能有效降低急性熱應(yīng)激小鼠的死亡率，緩解熱應(yīng)激造成的小鼠肝損傷?？梢杂行У奶岣邿釕?yīng)激奶山羊的免疫力，緩解熱應(yīng)激奶山羊產(chǎn)奶量的下降問(wèn)題，并研究了富硒女貞子三種有效成分對(duì)奶山羊外周血淋巴細(xì)胞增殖活性、細(xì)胞因子分泌

2、的影響。因此，我們對(duì)富硒女貞子進(jìn)行了抗奶牛熱應(yīng)激的研究，通過(guò)富硒女貞子對(duì)奶牛的抗熱應(yīng)激療效試驗(yàn)，觀察其對(duì)奶牛生產(chǎn)性能、血液學(xué)和血清生化指標(biāo)的影響及提取富硒女貞子蛋白觀察其對(duì)奶牛外周血淋巴細(xì)胞增殖活性和細(xì)胞因子分泌的影響。在前人的基礎(chǔ)上進(jìn)行富硒女貞子抗奶牛熱應(yīng)激的效果、作用機(jī)制及其有效部位群的探討。
　　試驗(yàn)一富硒女貞子對(duì)熱應(yīng)激奶牛的影響
　　為了探索富硒女貞子對(duì)奶牛熱應(yīng)激的干預(yù)作用，本試驗(yàn)在2014年7月21日到9月1日期間

3、，選用50頭年齡、胎次、產(chǎn)奶量相近的中國(guó)荷斯坦奶牛隨機(jī)分為5組，其中HS組、MS組和LS組分別按照每天60g/頭、40g/頭、20g/頭劑量的富硒女貞子拌飼，P組按每天40g/頭普通女貞子拌飼，C組為熱應(yīng)激對(duì)照組常規(guī)飼養(yǎng)。通過(guò)試驗(yàn)期間每旬前3天下午15時(shí)1次/天給藥，來(lái)觀察富硒女貞子對(duì)熱應(yīng)激奶牛生產(chǎn)性能、血液學(xué)和血清生化指標(biāo)的影響。結(jié)果顯示:用藥后，MS組的ACTH水平和皮質(zhì)醇水平顯著下降(P＜0.05)，T3恢復(fù)到正常水平。HS組、M

4、S組的HSP70水平顯著升高(P＜0.05)，MS組和P組的SOD和GSH-PX水平顯著提高(P＜0.05)。HS組MS組和P組的IFN-γ水平顯著提高(P＜0.05)，其中MS組差異極顯著(P＜0.01)。富硒女貞子3個(gè)組的奶產(chǎn)量較熱應(yīng)激前（5月1日到6月15日）分別下降了23.91％、28.87％、25.23％，與P組和C組分別下降的39.19％和36.55％有顯著差異(P＜0.05); MS組和P組的乳蛋白含量較熱應(yīng)激前也有顯著提

5、高(P＜0.05)。表明富硒女貞子可以有效的改善熱應(yīng)激期間奶牛的內(nèi)分泌、抗氧化能力、免疫能力，促進(jìn)HSP70分泌，從而在生產(chǎn)性能方面，富硒女貞子可以有效的緩解熱應(yīng)激期間奶牛產(chǎn)奶量的下降，并提高乳品質(zhì)。
　　試驗(yàn)二富硒女貞子蛋白對(duì)奶牛外周血淋巴細(xì)胞增殖活性、細(xì)胞因子分泌的影響
　　通過(guò)提取富硒女貞子蛋白和普通女貞子蛋白，并使用制備液相色譜從粗提的富硒女貞子蛋白中提取硒蛋白餾分(SLLPF)，采用MTT和ELISA法檢測(cè)這三種蛋

6、白質(zhì)對(duì)奶牛外周血淋巴細(xì)胞(peripheral blood lymphocyte; PBL)增殖活性和多種細(xì)胞因子分泌功能的影響，來(lái)探索富硒女貞子抗奶牛熱應(yīng)激的有效成分或/和有效部位群。試驗(yàn)結(jié)果表明，三種蛋白均可促進(jìn)ConA刺激下的奶牛外周血淋巴細(xì)胞增殖，效果隨濃度的增加而上升，富硒女貞子蛋白與硒蛋白餾分在濃度高于50μg/ml時(shí)較對(duì)照組效果顯著(P＜0.05)，在濃度高于400μg/ml時(shí)，普通女貞子蛋白較對(duì)照組差異顯著(P＜0.05

7、)，富硒女貞子蛋白和硒蛋白餾分較對(duì)照組差異極顯著(P＜0.01)，且富硒女貞子蛋白在各個(gè)濃度均優(yōu)于普通女貞子蛋白，差異顯著(P＜0.05)。富硒女貞子蛋白組和SLLPF組的的IL-2、IL4、IL-6、IFN-γ水平均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，其中富硒女貞子蛋白的IL-4和SLLPF組的IL-6水平較對(duì)照組有極顯著上升(P＜0.01)，普通女貞子蛋白的IL-4和IFN-γ較對(duì)照組也有顯著提高(P＜0.05)。說(shuō)明富硒女貞子蛋白可以

8、進(jìn)一步提高奶牛外周血淋巴細(xì)胞細(xì)胞活性，并調(diào)升細(xì)胞因子的分泌。同時(shí)提示富硒女貞子蛋白中的硒蛋白可能是富硒女貞子的有效部位群之一。
　　結(jié)論:富硒女貞子按每頭每天20g～60g的劑量拌料飼喂可以有效的緩解奶牛熱應(yīng)激導(dǎo)致的產(chǎn)奶量下降，以每頭每天40g的作用效果為佳，并且作用效果優(yōu)于普通女貞子。其作用機(jī)制是通過(guò)HPA軸來(lái)調(diào)節(jié)與熱應(yīng)激相關(guān)的ACTH、COR等激素，提高熱應(yīng)激期間奶牛的免疫力，增強(qiáng)抗氧化活性，調(diào)節(jié)HSP70等熱應(yīng)激休克蛋白表達(dá)