柴胡提取物對熱應激奶牛的應用效果及其抗熱應激機制研究.pdf

1、本論文研究了柴胡提取物（BE）對熱應激奶牛生產性能、血液激素、物質代謝、血常規(guī)、抗氧化能力以及免疫能力的影響，并研究了柴胡皂苷a(SSa)和d(SSd)對熱誘導奶牛乳腺上皮細胞抗氧化酶活和熱休克蛋白基因表達豐度的影響，初步探明了BE緩解奶牛熱應激的機理。為BE在熱應激奶牛生產中的應用提供了理論依據(jù)和參考。該研究主要從以下方面進行：
　　1.不同劑量BE對熱應激奶牛生產性能和血液基礎代謝的影響：試驗根據(jù)產奶量（37.5±1.8kg/

2、d）、泌乳天數(shù)（75±15 d）以及胎次（1.7±0.4）等相近的原則將40頭荷斯坦奶牛隨機分為4個處理組，每組10頭，分別飼喂4種不同的處理日糧，即在基礎日糧中分別添加0、0.25、0.5和1.0 g/kg的柴胡提取物（DM基礎），試驗期10周。試驗牛只采用栓系式飼養(yǎng)模式，單獨飼喂。試驗期間牛舍每天平均THI均大于72，因此，該試驗是在熱應激條件下完成的。結果表明，0.5 g/kgBE顯著降低了奶牛的RR（P<0.05）；不同劑量的B

3、E均降低了奶牛的RT，其中以中午時刻效果最顯著（P<0.01）；BE提高了熱應激奶牛的DMI（P<0.05），0.25和0.5 g/kg的BE劑量提高奶牛的產奶量（P<0.05）。
　　BE降低了熱應激奶牛血液中COR濃度（P<0.05），提高了T3、PRL、GH和LEP濃度（P<0.05），有降低GLU濃度的趨勢（P<0.1），但是對血清中T4、INS、NPY、IGF-I和HSP70含量沒有顯著影響。BE添加組顯著提高了奶牛血液

4、中TP含量（P<0.05），但是對Glu、NEFA、TG、TC、LDL-C和HDL-C沒有顯著影響（P>0.05）。0.25 g/kg的BE顯著增加了熱應激奶牛血液中ALB的含量（P<0.05），0.25和0.5 g/kg的BE顯著降低了熱應激奶牛血液中BUN的含量（P<0.05）。BE添加組顯著提高了熱應激奶牛血液中K+（P<0.05），但不影響Mg2+的濃度（P>0.05）。0.5和1.0 g/kg BE提高了熱應激奶牛血液中Na+

5、和Ca2+的濃度（P<0.05），1.0 g/kg BE降低了血液中P的濃度（P<0.05）。飼喂0.5 g/kgBE提高了血液中Cl含量（P<0.05）。
　　BE對WBC、MCV、MCHC、PLT和MPV的含量無顯著影響。0.5 g/kg BE提高了RBC、HGB、HCT和RDW的含量（P<0.05）。1.0 g/kg BE提高了MCH含量（P<0.05）。0.25 g/kg BE提高了熱應激奶牛的SOD和GSH-Px活性（P

6、<0.05）。添加BE有提高奶牛血液中T-AOC濃度和降低MDA含量的趨勢，但是差異不顯著（P>0.05）。0.25和0.5 g/kg BE提高了熱應激奶牛血液中IgA、IgG、IL-2、IL-4和IL-6的含量（P<0.05）；但是，BE對 IgM和 TNF-α的含量以及T淋巴細胞亞群CD4+、CD8+百分含量和CD4+/CD8+的比值無顯著影響（P>0.05）。
　　2.研究柴胡皂苷 a(SSa)和 d(SSd)對熱誘導奶牛乳

7、腺上皮細胞抗氧化酶活和熱休克蛋白家族基因表達的影響：以38℃作為對照組，以培養(yǎng)基中添加0、0.1、1.0μmo l/L的SSa和0、0.01、0.1μmo l/LSSd作為處理組，42℃處理1、4、8、12和24h，檢測奶牛乳腺上皮細胞中SOD、GSH-P x和C AT活性，熱休克蛋白家族基因表達及細胞培養(yǎng)基中MDA的含量。結果表明：42℃不同處理時間細胞的SOD、GSH-Px和CAT活性下降（P<0.05），MDA含量升高（P<0.0

8、5）。與42℃對照組相比，不同皂苷添加組能提高細胞中SOD、GSH-P x和C AT活性，降低細胞培養(yǎng)基中 MDA含量，在熱處理前4h，細胞中酶活活性提高（P<0.05），12h后，0.01和0.1μmol/LSSd劑量組MDA含量下降（P<0.05）。熱休克轉錄因子HSF-1和熱休克蛋白基因HSP27和HSP70在高溫處理前4h表達上調（P<0.05），HSP90的mRNA表達在熱處理8h后上調（P<0.05）。熱處理前4h時，SSa

9、和SSd組HSP70和HSP90基因的mRNA轉錄水平上調（P<0.05），熱處理1h時，SSa和SSd組HSP27基因的mRNA轉錄水平上調（P<0.05），SSa和SSd組的HSF-1基因的mRNA轉錄水平在熱處理8h時較38℃和42℃組細胞的HSF-1基因表達豐度上調（P<0.05）。因此，SSa和SSd提高了熱應激奶牛乳腺上皮細胞SOD、GSH-P x和C AT含量，顯著降低了 MDA含量，并且提高了熱休克蛋白家族基因的表達豐度