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文檔簡介
1、目的:
觀察淫羊藿苷對(duì)產(chǎn)前應(yīng)激子鼠行為學(xué)影響,檢測(cè)海馬區(qū)、前額葉皮層區(qū)Ⅰ族代謝型谷氨酸受體mGluR1、mGluR5和轉(zhuǎn)運(yùn)體EAAT2表達(dá)變化,探究淫羊藿苷的抗抑郁作用。
方法:
1.對(duì)懷孕后期SD大鼠,建立產(chǎn)前慢性束縛應(yīng)激動(dòng)物模型,將雄性子鼠隨機(jī)分成5組:空白對(duì)照組(CON)、產(chǎn)前應(yīng)激組(PS)、生理鹽水組(NS)、淫羊藿苷高劑量組(80mg/kg/day)、淫羊藿苷低劑量組(40mg/kg/day)。<
2、br> 2.分別運(yùn)用糖水偏好、強(qiáng)迫游泳和曠場實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)各組子鼠抑郁樣行為。
3.采用蛋白免疫印跡法(Western Blot)測(cè)定各組子鼠海馬區(qū)、前額葉皮層區(qū)mGluR1、mGluR5、EAAT2蛋白表達(dá)。
4.采用實(shí)時(shí)定量PCR實(shí)驗(yàn)測(cè)定各組子鼠海馬區(qū)及皮層區(qū)mGluR1、mGluR5、EAAT2mRNA表達(dá)。
結(jié)果:
1.糖水偏好實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,五組子鼠飲水總量不變,與CON相比較,PS組糖水偏好
3、所占百分?jǐn)?shù)明顯下降,淫羊藿苷高低劑量組糖水偏好所占百分?jǐn)?shù)與NS組相比明顯上升。
2.強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,PS誘導(dǎo)子鼠不動(dòng)時(shí)間明顯延長,掙扎時(shí)間明顯縮短,淫羊藿苷灌胃給藥后不動(dòng)時(shí)間顯著縮短,掙扎時(shí)間延長。
3.曠場實(shí)驗(yàn)中,PS組子鼠穿越中央方格的次數(shù),中央格停留時(shí)間較CON組顯著減少,淫羊藿苷(80mg/kg或40mg/kg)給藥后,子鼠穿越中央格次數(shù)和中央格停留時(shí)間顯著增加;PS也能導(dǎo)致直立次數(shù)減少,淫羊藿苷干預(yù)后
4、直立次數(shù)較NS組顯著增加,但各組間并沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05);在曠場試驗(yàn)中,五組子鼠的理毛次數(shù)也無顯著差異性(p>0.05)。
4.Western Blot結(jié)果表明,在海馬區(qū)和前額葉皮層區(qū),PS組與CON組相比,mGluR1、mGluR5蛋白表達(dá)顯著升高,EAAT2蛋白表達(dá)顯著降低;淫羊藿苷高劑量組能使PS子鼠海馬區(qū)、前額葉皮層區(qū)mGluR5蛋白表達(dá)明顯下調(diào),海馬區(qū)EAAT2蛋白水平明顯上調(diào),前額葉皮層區(qū)mGluR1蛋白
5、水平顯著下調(diào);與NS組相比,而淫羊藿苷低劑量組使海馬區(qū)與皮層區(qū)mGluR1蛋白水平明顯降低,EAAT2蛋白水平明顯增高,使海馬區(qū)mGluR5蛋白水平顯著下調(diào)。
5.實(shí)時(shí)定量PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,PS子鼠海馬區(qū)與皮層區(qū)mGluR1、mGluR5mRNA表達(dá)顯著升高,EAAT2mRNA表達(dá)顯著降低;淫羊藿苷灌胃給藥后(80mg/kg或40mg/kg),可顯著逆轉(zhuǎn)PS子鼠海馬區(qū)與前額葉皮層區(qū)mGluR1、mGluR5及EAAT2mRN
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