洋蔥LEAFY和FT同源基因的克隆與表達(dá)初析.pdf

1、洋蔥(Allium.capeLinn)又名球蔥、圓蔥,為百合科蔥屬兩年生草本植物,種子繁殖。洋蔥為綠體春化型植物,低溫和光周期是其抽薹開花的必要條件。FT(FLOWERINGLOCUST)基因是花發(fā)育途徑中的匯集點(diǎn),是光周期途徑植物開花時(shí)間決定關(guān)鍵基因;LEAFY,基因不僅控制著花序分生組織向花分生組織的轉(zhuǎn)變而且是影響植物的開花時(shí)間以及花序形態(tài)的重要基因。目前尚未見到洋蔥刀及LEAFY同源基因的相關(guān)報(bào)道。
　　 本研究以洋蔥10

2、07品系為材料,篩選出適合提取洋蔥葉片RNA的方法;依據(jù)FT及LEAFY同源基因保守區(qū)設(shè)計(jì)兼并引物,分別以1007品系營養(yǎng)生長時(shí)期的葉片及抽薹初期莖頂端分生組織的RNA為模板,采用RT-PCR的方法克隆了Fir、LEAFY同源基因的CDS序列,并對它們的時(shí)空表達(dá)模式進(jìn)行了初步分析,為研究蔥蒜類作物抽薹開花的分子調(diào)控機(jī)制打下基礎(chǔ)。
　　 試驗(yàn)結(jié)果如下:
　　 1.采用TIANDZ柱式植物RNAout能夠快速高效的提取洋蔥葉

3、片的RNA,可有效去除其中的多糖,并且RNA純度較高,小RNA回收效率更高,完全適合于洋蔥進(jìn)一步的分子生物學(xué)研究。
　　 2.采用RT-PCR技術(shù),首次克隆得到了洋蔥刀同源基因的CDS序列,長度185bp,編碼62個(gè)氨基酸序列。
　　 3.采用RT-PCR技術(shù),首次克隆得到了洋蔥LEAFY同源基因的CDS序列,長度324bp,編碼108個(gè)氨基酸序列。
　　 4.FT同源基因在其營養(yǎng)生長時(shí)期的葉片中無表達(dá),隨著營養(yǎng)