果蔗宿根矮化病檢測(cè)及Co60輻照遺傳生理差異.pdf

1、果蔗即鮮食甘蔗，由于品種少、種苗病害多，種性退化嚴(yán)重。Co60-γ射線輻照育種對(duì)無性繁殖作物具有遺傳變異穩(wěn)定、育種成效快等優(yōu)點(diǎn)?；诖?，本研究（1）擬對(duì)新引進(jìn)的6個(gè)果蔗品種進(jìn)行宿根矮化病菌檢測(cè)及核苷酸序列分析，為果蔗脫毒種苗生產(chǎn)提供依據(jù)。（2）應(yīng)用 Co60-γ射線輻照不同基因型果蔗，結(jié)合分子標(biāo)記研究供體及輻照系遺傳變異，為果蔗輻射育種提供理論基礎(chǔ)。（3）測(cè)定和比較供體及其輻照系不同生育時(shí)期主要保護(hù)酶、蔗糖合成相關(guān)酶的酶活及可溶性滲透物

2、質(zhì)的含量變化，從中篩選出主要生理指標(biāo)上調(diào)的輻照系，為培育豐產(chǎn)優(yōu)質(zhì)多抗果蔗新品種（系）提供材料。主要結(jié)果如下：
　?。?）采用PCR和巢式PCR技術(shù)對(duì)6個(gè)新引進(jìn)果蔗品種黔蔗08-1497，黔糖5號(hào)，云南紅皮，廣東黃皮，黔蔗08-688，黔糖3號(hào)和廣東主栽果蔗品種黑皮果蔗（Badila）進(jìn)行宿根矮化病菌檢測(cè)，并對(duì)其中廣東黃皮、云南紅皮、黔糖3號(hào)及黑皮果蔗的巢式PCR第二輪擴(kuò)增產(chǎn)物（編號(hào)依次為 Lxx-Gd-gz1、Lxx-Gd-gz2

3、、Lxx-Gd-gz3及Lxx-Gd-gz4）進(jìn)行核苷酸序列測(cè)定及分析。結(jié)果表明，PCR檢測(cè)，僅黔蔗08-688甘蔗宿根矮化病菌檢出率為20％（1/5），其余6個(gè)果蔗品種的宿根矮化病菌檢出率均為0%；巢式PCR檢測(cè)，黔蔗08-1497及黔糖5號(hào)宿根矮化病菌檢出率為0%，廣東黃皮檢出率為75%；云南紅皮、黔蔗08-688、黔糖3號(hào)及黑皮果蔗檢出率均為100%。Lxx-Gd-gz1、Lxx-Gd-gz2、Lxx-Gd-gz3及Lxx-Gd-

4、gz4基因組相應(yīng)區(qū)段核苷酸序列同源率為100%，均與巴西、澳大利亞、美國(guó)路易斯安娜州、中國(guó)云南、中國(guó)福建及廣東湛江株系核苷酸序列同源率均為99%。表明該病菌遺傳穩(wěn)定性極高，變異極小。
　?。?）分別從40條SCoT引物及50條ISSR引物中篩選出擴(kuò)增條帶清晰、多態(tài)性高的SCoT引物11條及ISSR引物13條。11條SCoT引物對(duì)24份材料共擴(kuò)增出101條帶，其中多態(tài)性條帶為82條，平均多態(tài)率為81.19%，平均單引物擴(kuò)增條帶數(shù)為9

5、.18，平均等位基因數(shù)Na為1.8119，平均有效等位基因數(shù)Ne為1.4948，平均基因多樣性指數(shù)H為0.2912，平均Shannon`s信息指數(shù)I為0.4348；13條ISSR引物對(duì)24份材料共擴(kuò)增103條帶，其中多態(tài)性條帶數(shù)為82條，平均多態(tài)率為79.61%，平均單引物擴(kuò)增條帶數(shù)為7.92，平均等位基因數(shù)Na為1.7961，平均有效等位基因數(shù)Ne為1.5839，平均基因多樣性指數(shù)H為0.3240，平均Shannon`s信息指數(shù)I為0

6、.4702。上述參數(shù)表明果蔗SCoT和ISSR標(biāo)記具有較好的多態(tài)性，適合應(yīng)用于進(jìn)一步的遺傳多樣性研究?；赟CoT、ISSR及SCoT+ISSR合并數(shù)據(jù)構(gòu)建的UPGMA聚類圖譜分析證實(shí)3個(gè)不同基因型果蔗品種（黑皮果蔗、青皮果蔗及貴州果蔗）經(jīng)Co60-γ射線50gy輻照30min均可產(chǎn)生不同程度的遺傳變異。同時(shí)，還證實(shí)黑皮果蔗和青皮果蔗的遺傳基礎(chǔ)較近，而與貴州果蔗的遺傳距離較遠(yuǎn)。
　?。?）經(jīng)過對(duì)3個(gè)不同果蔗品種及其輻照系的苗期、分