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文檔簡介
1、低氧與許多生理和病理過程相關,目前我國死亡率前四名的心血管病、腦中風、腫瘤和呼吸系統(tǒng)疾病都直接或間接涉及機體低氧,研究生物體對低氧的反應機制具有重大意義。本研究利用生物信息學方法,從人大動脈內(nèi)皮細胞(humanaortic endothelial cells,HAECs)短期、持續(xù)低氧處理的SAGE庫中,挖掘與低氧反應相關的新基因;用3D-PSSM和CDD(Conserved Domain Database)等軟件預測新基因蛋白產(chǎn)物的功
2、能;從中選擇感興趣的候選基因,對其進行進一步的生物信息學分析,最終確定對2個基因進行克隆。結(jié)果如下: l、從人大動脈內(nèi)皮細胞(human aortic endothelial cells,HAECs)短期、持續(xù)低氧處理8h的SAGE庫中的40629個tags(12289 unique)中挖掘出998個與低氧反應相關的新基因。 2、用3D-PSSM和CDD等軟件從998個與低氧反應相關的新基因中預測到369個蛋白產(chǎn)物有
3、功能的新基因,根據(jù)功能將其分為14類,其中大部分與信號傳導、基因的表達調(diào)控、細胞骨架和翻譯后修飾有關。 3、選擇了8個感興趣的侯選基因,對其進行了進一步的生物信息學分析,最終選定了第1、4號2個基因進行克隆。 4、構(gòu)建了第1號基因的鼠源序列的真核表達載體(pcDNA3.1/Myc-His(-)AMCS);構(gòu)建了第4號基因的人源和鼠源序列的真核表達載體fcDNA3.1/Myc-His(-)AMCS),測序證明了序列的正確性
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