孕酮介導的卵母細胞成熟信號通路在棉蚜生殖方式轉換中的作用研究.pdf

1、棉蚜(Aphis gossypii Glover)是重要的農(nóng)業(yè)害蟲，在我國北方它能隨季節(jié)的變化進行周期性的孤雌生殖和有性生殖，即春夏以孤雌蚜進行無性生殖而大量繁殖，秋天產(chǎn)生性母，進而產(chǎn)生性雌，與雄蚜交配產(chǎn)卵，以卵過冬。雖然棉蚜的全生活史及生殖型轉換（或生殖可塑性）方式已經(jīng)明了，但其中的分子機制一直不清楚。目前研究蚜蟲生殖型轉換的一個模式是豌豆蚜(Acyrthosiphon pisum Harris)，與豌豆蚜不同，棉蚜有明顯的性母并且轉

2、換寄主植物。之前我們實驗室利用RNA-seq測定了棉蚜孤雌、性母、性雌三種生殖型的差異基因表達譜，通過GO聚類和KEGG通路分析富集出了光傳導、孕酮介導的卵母細胞成熟、內(nèi)分泌調節(jié)、以及表皮構成信號通路。
　　本論文選擇孕酮介導的卵母細胞成熟信號通路和光傳導信號通路進行了初步研究。首先利用qRT-PCR對孕酮介導的卵母細胞成熟信號通路中的bub1、ccna2、polo、plk1和mad2基因進行了表達驗證，bub1、ccna2和po

3、lo在孤雌中的表達水平顯著高于性母。通過注射dsRNA對bub1、ccna2和polo進行了初步的RNAi實驗，發(fā)現(xiàn)bub1或ccna2 RNAi能夠影響孤雌蚜的卵巢發(fā)育，但是否影響生殖型轉換目前還不能確定。同時，也通過qRT-PCR測定了光傳導信號通路中的ninac、opsin、arr2、GNB2、Trp和ANA基因從孤雌向性母轉化過程中的時序表達模式，發(fā)現(xiàn)ninac、opsin、arr2和GNB2的表達水平在性母4齡若蟲期顯著上升。