Cdc25B在小鼠卵母細(xì)胞成熟過程中調(diào)節(jié)機(jī)制的研究.pdf

1、所有哺乳動(dòng)物的卵母細(xì)胞都存在G2期阻滯，G2期阻滯的卵母細(xì)胞有一特征性核結(jié)構(gòu)--生發(fā)泡(germinal vesicle)，減數(shù)分裂恢復(fù)后，生發(fā)泡破裂(GVBD，germinal vesicle break down)，染色體凝集，紡錘體形成，第一極體形成后，立即進(jìn)行第二次減數(shù)分裂，在MⅡ期阻滯直至受精。在減數(shù)分裂恢復(fù)過程中，MPF(有絲分裂促進(jìn)因子)的激活是啟動(dòng)卵母細(xì)胞減數(shù)分裂成熟的核心環(huán)節(jié)。MPF的催化亞基Cdc2是一種分子量34K

2、D左右的蛋白激酶，它需要與周期蛋白(Cyclin)B結(jié)合才能產(chǎn)生活性，在復(fù)合物形成后Cdc2主要受磷酸化和去磷酸化作用的調(diào)節(jié)，由蛋白激酶Weel或Myt1催化14/Thr(蘇氨酸殘基)和15/Tyr(酪氨酸殘基)磷酸化使其失活。 生物信息學(xué)提示Cdc25B蛋白存在核輸出序列(nuclear export sequence，NES)位于52-65位氨基酸(VTTLTQTMHNLAGL)及核定位序列(nuclear localiza

3、tion sequence,NLS)位于343-350位氨基酸(PVQSKRRK)。通過構(gòu)建突變體的形式，觀察Cdc25B蛋白的定位和功能的關(guān)系，探討Cdc25B蛋白對小鼠卵母細(xì)胞減數(shù)分裂的調(diào)節(jié)機(jī)制。 實(shí)驗(yàn)研究表明: 1、149位絲氨酸是Cdc25B蛋白誘導(dǎo)小鼠卵母細(xì)胞減數(shù)分裂恢復(fù)和蛋白質(zhì)正常的亞細(xì)胞定位所必需的。 2、小鼠卵母細(xì)胞Cdc25B蛋白質(zhì)的N端52-65位氨基酸之間存在一有功能的核輸出序列，與蛋白質(zhì)的