急性腎損傷早期診斷氨基酸標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)與評(píng)價(jià).pdf

1、[背景及目的]:
　　急性腎損傷（Acute Kidney Injury，AKI）是腎臟結(jié)構(gòu)和功能受損的一種疾病狀態(tài)，以突發(fā)和持續(xù)的腎功能下降為特征，是由不同病因?qū)е碌?、涉及全身各系統(tǒng)癥狀的臨床綜合征。2013年我國約有290萬住院患者罹患AKI，死亡率約24％。AKI的發(fā)生增加了住院患者醫(yī)療費(fèi)用和死亡率，同時(shí)造成醫(yī)療資源的浪費(fèi)。目前AKI的診斷主要依靠血肌酐的升高和尿量的減少，而這兩個(gè)指標(biāo)對(duì)AKI的診斷較為滯后，不能及時(shí)反映患者

2、腎臟的真實(shí)損傷情況，發(fā)掘新的有效AKI早期診斷標(biāo)志物有助于解決當(dāng)前AKI的診斷不足。
　　腎臟參與體內(nèi)多種氨基酸的代謝與排泄過程，體內(nèi)氨基酸水平受到腎臟功能的調(diào)節(jié)，腎臟功能受到損傷時(shí)常發(fā)生氨基酸代謝紊亂。近年來研究發(fā)現(xiàn)，多種氨基酸水平與腎臟疾病患者的腎功能和預(yù)后顯著相關(guān)，如非對(duì)稱二甲基精氨酸、對(duì)稱二甲基精氨酸、S-腺苷同型半胱氨酸等。由此可見氨基酸可能成為發(fā)掘有效AKI早期診斷標(biāo)志物新的研究群體。
　　本研究應(yīng)用課題組前期建

3、立的靶向氨基酸定量分析技術(shù)，以腎臟缺血再灌注大鼠和心臟手術(shù)患者為研究對(duì)象，進(jìn)行氨基酸分析和AKI標(biāo)志物篩選。AKI是急性腎病的一種狀態(tài)同時(shí)與慢性腎病關(guān)系密切，一方面AKI可以在慢性腎病的基礎(chǔ)上發(fā)生，另一方面部分AKI患者腎功能未能完全恢復(fù)也可能進(jìn)展為慢性腎損傷。因此，我們還對(duì)慢性腎病患者體內(nèi)氨基酸代謝紊亂情況進(jìn)行了研究，探索氨基酸標(biāo)志物對(duì)慢性腎病的診斷作用，以拓展氨基酸標(biāo)志物的應(yīng)用范圍。
　　[材料與方法]:
　　1、建立大

4、鼠腎臟缺血再灌注模型，采集AKI發(fā)生后24小時(shí)內(nèi)的多時(shí)間點(diǎn)血清樣本進(jìn)行23種氨基酸定量分析并篩選氨基酸標(biāo)志物，采用受試者工作曲線評(píng)估氨基酸標(biāo)志物對(duì)AKI的診斷情況，并與肌酐、尿素氮以及中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)載脂蛋白進(jìn)行比較。
　　2、以心臟手術(shù)患者為研究對(duì)象，采集患者術(shù)后24小時(shí)內(nèi)的多時(shí)間點(diǎn)血漿樣本進(jìn)行23種氨基酸定量分析。篩選氨基酸標(biāo)志物，并對(duì)標(biāo)志物進(jìn)行AKI診斷分析。
　　3、收集慢性腎病患者和健康志愿者血漿樣本，篩選兩組

5、患者間差異氨基酸，分析差異氨基酸對(duì)慢性腎病的診斷作用。
　　[研究結(jié)果]:
　　1、腎臟缺血再灌注大鼠血漿對(duì)稱二甲基精氨酸、犬尿氨酸、馬尿酸和氧脯氨酸水平在損傷后24小時(shí)內(nèi)均對(duì)AKI具有診斷作用。四種氨基酸標(biāo)志物從腎臟損傷后1小時(shí)開始對(duì)AKI具有較好的診斷作用，其中犬尿氨酸和馬尿酸對(duì)AKI的診斷作用最佳，診斷能力高于中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)載脂蛋白和血肌酐水平。
　　2、心臟手術(shù)患者血漿對(duì)稱二甲基精氨酸和馬尿酸水平在術(shù)后多

6、個(gè)時(shí)間具有AKI診斷作用。對(duì)稱二甲基精氨酸從12小時(shí)開始對(duì)AKI具有診斷作用，且診斷能力高于術(shù)后12小時(shí)血肌酐;馬尿酸水平在術(shù)后8小時(shí)開始對(duì)AKI具有診斷作用，診斷效能與12小時(shí)血肌酐水平相當(dāng)，但診斷時(shí)間更早。
　　3、對(duì)稱二甲基精氨酸作為腎功能標(biāo)志物不僅可以用于AKI的診斷，對(duì)慢性腎病也具有較高的診斷能力。此外，慢性腎病患者體內(nèi)氨基酸代謝紊亂還包括色氨酸、酪氨酸、賴氨酸、纈氨酸、對(duì)稱二甲基精氨酸、甲硫氨酸、組氨酸和亮氨酸;這些氨