復方蒿甲醚-本芴醇片處方工藝改進及增加蒿甲醚和本芴醇溶解度的研究.pdf

1、瘧疾是由蚊蟲傳播的一種疾病，是嚴重危害人類健康的全球性傳染病之一，與艾滋病、結核病一起被世界衛(wèi)生組織列為全球急需控制的三大公共衛(wèi)生問題，廣泛流行于亞洲、非洲及拉丁美洲的107個國家或地區(qū)。
　　瘧疾的治療藥物有很多，但是有些由于使用時間過長，不可避免的出現(xiàn)了一些抗藥性，在研制新型抗瘧藥物的同時，將原有的藥物組成復方制劑用于治療瘧疾不失為一種有效的手段，由蒿甲醚與本芴醇組成的復方制劑，為世界衛(wèi)生組織推薦的瘧疾治療藥物，在瘧疾的治療中

2、發(fā)揮了巨大作用。但蒿甲醚與本芴醇水溶性差、生物利用度低，因此有必要提高它們的水溶性以改善生物利用度，從而減少給藥量、降低毒副作用。本課題首先對復方蒿甲醚/本芴醇片劑目前企業(yè)存在的問題進行研究;然后將蒿甲醚制備包合物，本芴醇制備納米脂質載體，改善蒿甲醚和本芴醇溶解度，提高生物利用度的方法，通過動物實驗驗證溶解度的改善和生物利用度的提高，為復方蒿甲醚/本芴醇新劑型的開發(fā)提供依據。
　　1.復方蒿甲醚/本芴醇片的處方工藝改進
　　

3、目前“復方蒿甲醚/本芴醇片”企業(yè)存在的主要問題是:可壓性差、黏沖、崩解時間長，溶出度低。
　　對蒿甲醚和本芴醇分別制粒、分別壓片，確定粘沖的原因，以分散均勻性、脆碎度、粘沖情況為評價指標，分別選用乳糖、甘露醇、MCC、乳糖與MCC的混合物作為填充劑，通過改變處方組成成分及比例調節(jié)可壓性差;采用薄膜液法、改變制粒工藝，解決片劑生產過程中存在的粘沖問題;在保證片子硬度和脆碎度合格的同時，減小片子壓力，分別選用L-HPC、CMS-Na、

4、PVPP作為崩解劑進行篩選，調節(jié)使用崩解劑的種類、用量和加入方法等改善片劑崩解時間和溶出度。
　　結果表明，采用薄膜液法解決粘沖問題，該方法簡單有效、便于大規(guī)模生產。以MCC作為填充劑效果最佳;分別選用不同濃度的HPMC E50溶液作為粘合劑進行篩選，最終選擇3％的HPMC E50溶液作為粘合劑解決粘沖問題;選用L-HPC和PVPP作為崩解劑，分別內加75％外加25％，壓片厚度選擇2.7mm，壓片速度選擇15rpm。三批重現(xiàn)性試驗

5、所制備的片劑，外觀、含量、含量均勻度、脆碎度均符合要求。
　　以上通過處方工藝改進，復方蒿甲醚和本芴醇片的溶出度較原工藝片有所提高，但蒿甲醚的溶出較慢，本芴醇的溶出介質中加入了較多的表面活性劑才滿足溶出要求，與體內環(huán)境差別較大，因此，尋找新的方法提高蒿甲醚和本芴醇的溶解度，提高其生物利用度非常重要。
　　2.蒿甲醚-2-HP-β-CD包合物研究
　　針對蒿甲醚的結構和理化性質，選擇2-HP-β-CD為載體制備包合物增加

6、其溶解度。
　　(1)將蒿甲醚與1mol/1鹽酸進行衍生化反應，采用UV法測定蒿甲醚包合物的含量并進行了方法學考察;
　　(2)采用溶液攪拌法制備蒿甲醚包合物，分別對投料比、攪拌時間、攪拌溫度進行了考察，以載藥量和包合率為評價指標，對處方工藝因素進行優(yōu)化，通過重現(xiàn)性試驗確定了處方工藝的穩(wěn)定性;
　　(3)分別用紅外光譜法、差示掃描量熱法、溶解度實驗和熔點測定法對所制備的包合物進行了驗證，并對包合物的穩(wěn)定性進行了初步考察

7、;
　　(4)建立了高效液相法測定血漿樣品中蒿甲醚濃度的方法并進行了方法學考察，以火鼠為研究對象，分別灌胃給予蒿甲醚原料藥和包合物，分別于給藥后0.25、0.5、0.75、1、2、3、4、6、8h于大鼠頸靜脈竇取血，將樣品處理后進行血藥濃度的測定，繪制蒿甲醚的血漿藥物濃度隨時間變化的曲線，用DAS2.0軟件求算相關藥物動力學參數(shù)，對原料藥和包合物的體內釋藥進行分析比較。
　　結果表明:
　　(1)蒿甲醚衍生物在1 mm

8、ol/1鹽酸溶液中，線性關系良好，精密度、回收率高，輔料不干擾主藥測定，采用UV法測定蒿甲醚包合物的含量方法可行。分別用研磨法、溶液攪拌法和超聲法制備了蒿甲醚包合物，結果選擇溶液攪拌法，投料比為1:36、攪拌溫度50℃、攪拌時間1h，三批重現(xiàn)性實驗制備的包合物載藥量和包合率分別為2.63％±0.01％和97.53％±0.36％，說明該法制各蒿甲醚包合物處方工藝穩(wěn)定、重現(xiàn)性好。
　　(2)紅外光譜法驗證結果表明包合物的紅外圖譜和2-

9、HP-β-CD的基本一致，與蒿甲醚和2-HP-β-CD物理混合物的圖譜略有不同;差示掃描量熱法驗證結果表明，與物理混合物比較，包合物中藥物的吸熱峰和放熱峰均消失;溶解度實驗測定結果顯示蒿甲醚包合物的溶解度為11.28±2.24mg/ml，較原料藥在水中的溶解度1.18μg/ml有顯著提高;采用毛細管法測定蒿甲醚包合物的熔點，結果為226-229℃，查閱文獻可知，蒿甲醚的熔點為86-89℃，2-HP-β-CD的熔點為278℃，蒿甲醚包合物

10、的熔點與原料藥和載體材料明顯不同。以上四種驗證方法均說明包合物已形成。
　　(3)穩(wěn)定性實驗考察結果表明，在高溫和光照條件下，包合物中的藥物含量下降較少，高濕條件下藥物含量下降較大，具有較強的引濕性，因此，該制劑儲存時，應密閉防潮保存。
　　(4)采用高效液相法測定血漿樣品中蒿甲醚濃度，專屬性強、線性關系良好、精密度高、回收率和穩(wěn)定性符合測定要求，內源性成分不干擾主藥測定，符合生物測定要求。藥物動力學實驗結果表明，原料藥組和

11、包合物組的消除半衰期(t1/2)分別為2.73h和1.80h;平均滯留時問(MRT0-∞)分別為3.94h和3.72h;達峰時(tmax)分別為3h和2h;峰濃度(Cmax)分別為4.19μg/ml和8.86μg/ml;血藥濃度-時問曲線下面積(AUC0-∞)分別為25.55μg/ml·h和36.88μg/ml·h，血漿中的AUC0-∞包合物組是原料藥組的1.44倍，蒿甲醚制備成包合物后，吸收更快，起效更為迅速，生物利用度明顯提高。

12、r>　　3.本芴醇NLC的研究
　　針對本芴醇的結構和理化性質，選擇納米脂質載體(NLC)增加其溶解度。
　　(1)采用UV法測定本芴醇NLC的含量并進行了方法學考察;
　　(2)采用超聲分散法制備本芴醇NLC，以粒徑、包封率、載藥量為評價指標，進行了處方工藝的篩選，考察了藥脂比、液固脂質比、相體積比等處方因素以及滴加速度、乳化時間、攪拌時間等工藝因素，通過重現(xiàn)性試驗驗證處方工藝的穩(wěn)定性，并對本芴醇NLC理化性質進行了

13、研究;
　　(3)采用冷凍干燥技術制備本芴醇NLC粉針劑，篩選了凍干保護劑甘露醇的用量，以粒徑、包封率為評價指標對三批重現(xiàn)性試驗制各的本芴醇NLC進行評價;
　　(4)對本芴醇NLC凍干制劑的穩(wěn)定性進行了初步考察;
　　(5)建立了高效液相法測定血漿樣品中本芴醇濃度的方法并進行了方法學考察，以大鼠為研究對象，分別灌胃本芴醇原料藥和本芴醇NLC，分別于給藥后0.5、2.0、5.0、8.0、24.0、30.0、48.0、5

14、4.0、72.0、120.0h于大鼠頸靜脈竇取血，將樣品處理后進行血藥濃度的測定，繪制本芴醇的血漿藥物濃度隨時間變化的曲線，用DAS2.0軟件求算相關藥物動力學參數(shù)，對原料藥和NLC的體內釋藥進行分析比較。
　　結果表明:
　　(1)本芴醇在乙醇溶液中，線性關系良好，精密度、回收率高，輔料不干擾主藥測定，采用UV法測定本芴醇NLC的含量方法可行。
　　(2)分別用熔融乳化-低溫固化法、超聲分散法、高壓勻質法制備本芴醇N

15、LC，結果選擇超聲分散法，確定的最優(yōu)處方為:藥脂比1∶8、液固脂質比為1∶3、泊洛沙姆188的濃度為0.50％、相體積比1∶4;最佳制備工藝為:滴加速度12ml/h、乳化時間40min、攪拌速度1000rpm、超聲時間15min。按最優(yōu)處方工藝制備三批本芴醇NLC，電鏡圖片顯示其為類球形、大小均一，粒徑為213.30±8.54nm，分布較為均勻，pH為6.43±0.19，包封率為94.90±0.51％、載藥量為9.05±0.19％，表明

16、處方工藝穩(wěn)定，重現(xiàn)性好。
　　(3)進行了本芴醇NLC凍干制劑的研究，篩選了凍干保護劑甘露醇的用量，以粒徑、包封率為指標對三批重現(xiàn)性試驗制備的本芴醇NLC進行評價，結果為，粒徑295.7±11.9nm，包封率93.70±1.52％，說明處方工藝穩(wěn)定，重現(xiàn)性好。
　　(4)穩(wěn)定性實驗考察結果表明，在高溫和光照條件下，本芴醇NLC中的藥物含量下降程較少，高濕條件下藥物含量下降較大，具有較強的引濕性，因此，該制劑儲存時，應密閉防潮

17、保存。
　　(5)采用高效液相法測定血漿樣品中本芴醇濃度，專屬性強、線性關系良好、精密度高、回收率和穩(wěn)定性符合測定要求，內源性成分不干擾主藥測定，符合生物測定要求。藥物動力學實驗結果表明，原料藥組和NLC組的消除半衰期(t1/2)分別為23.09h和42.89h;平均滯留時間（MRT0-∞）分別為43.81h和42.00h;達峰時(tmax)分別為8h和2h;峰濃度(Cmax)分別為2.57μg/ml和4.81μg/ml;血藥濃度

18、-時間曲線下面積(AUC0-∞)分別為111.07μg/ml·h和182.93μg/ml·h，血漿中的AUC0-∞包合物組是原料藥組的1.65倍，蒿甲醚制備成NLC后，吸收更快，起效更為迅速，生物利用度明顯提高。
　　4.結論
　　薄膜液法解決片劑工業(yè)生產中的粘沖問題是一種有效的、便于大規(guī)模生產的方法;溶液攪拌法制備的蒿甲醚包合物溶解性較原料藥顯著提高，生物利用度也有較大改善，該方法對解決難溶性藥物的溶解度，對包合物的工業(yè)生