安徽宿州地區(qū)大豆疫霉的分離與鑒定.pdf

1、大豆疫病(Soybean blight),也叫做大豆疫霉根腐?。?Phytophthora root rot of soybean），是由大豆疫霉（Phytophthora sojae）引起的危害大豆最嚴(yán)重的病害之一。本學(xué)位論文對宿州地區(qū)大豆疫霉進(jìn)行分離的基礎(chǔ)上，對其形態(tài)學(xué)以及致病型進(jìn)行了鑒定，并且對其核糖體的ITS序列進(jìn)行系統(tǒng)研究。主要研究結(jié)果如下：
　　從宿州地區(qū)的大田采集土樣50份，采用葉蝶誘捕法對土樣進(jìn)行誘捕分離,分離到2

2、株菌株，分離菌株頻率為4％。
　　形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果表明，分離獲得的2個菌株，菌絲無隔，近直角分支，可形成菌絲膨大體，直徑為3.1~9.6μm，平均值為5.05μm；孢子囊呈倒梨形，無乳突，具有內(nèi)層出現(xiàn)象，孢子囊長21.2μm~85.3μm，平均值為44.99μm，寬16.3~32.6μm，平均值為27.94μm，長寬比約為1.61，分離獲得的兩個菌株均為同宗配合。藏卵器呈球形或近球形，直徑為27.3~48.7μm，平均值為36.49

3、μm，卵孢子呈圓形，淡黃色，直徑為20.3~41.2μm，平均值為29.42μm，雄器多數(shù)為側(cè)身，少量圍生，大小為13.22（5.60~18.10）μm×11.14（5.90~15.30）μm。參照主要疫霉分類檢索表，將上述分離鑒定為大豆疫霉（Phytophthora sojae）。致病性測定結(jié)果表明，分離得到兩個菌株均對合豐35大豆品種具有致病性，接菌后大豆植株的發(fā)病癥狀與自然狀態(tài)下田間的大豆發(fā)病癥狀相同，根據(jù)科赫氏法則進(jìn)一步證明為大

4、豆疫霉（Phytophthora sojae）。
　　在上述研究的基礎(chǔ)上，對分離的菌株利用下胚軸接種法接種于15個含有不同抗病基因的大豆品種上，結(jié)果分離到的2個菌株分屬2個不同的致病型，其中SZ1的致病型為3c,4,5,6,7；SZ5的致病型為1b,1d,a,3b,4,5,7,8。
　　使用大豆疫霉 ITS序列特異性引物，通過 PCR擴(kuò)增2個菌株，分離獲得的菌株均能夠擴(kuò)增出1條300 bp的條帶。利用 Clustalx軟件和