大豆疫霉RXLR效應(yīng)分子靶標(biāo)的篩選.pdf

1、由大豆疫霉(Phytophthora sojae Kaufmann＆Gerdemann)侵染大豆引起的疫霉根腐病是大豆生產(chǎn)上的毀滅性病害之一。寄主的抗病性是控制大豆疫病最有效的措施，但是在大豆疫霉侵染寄主過(guò)程中，病原菌能分泌大量的效應(yīng)分子破壞植物的抗病反應(yīng)。大豆疫霉基因組編碼大約350個(gè)左右含有RXLR motif的效應(yīng)蛋白，已有研究證明這些效應(yīng)蛋白進(jìn)入寄主細(xì)胞后具有阻斷植物抗病反應(yīng)，提高病原菌侵染的能力。但是，關(guān)于這些效應(yīng)分子進(jìn)入植物

2、細(xì)胞后和哪些植物靶標(biāo)相互作用，如何干擾植物的防衛(wèi)反應(yīng)還缺乏研究。
　　 目前已經(jīng)鑒定了包括AvrB、Avr Rpm1和Avr Rpt2等植物病原細(xì)菌效應(yīng)分子的作用靶標(biāo)，由于植物抗病反應(yīng)信號(hào)通路的高度保守性，我們推測(cè)疫霉菌可能利用同樣的途徑干擾植物的防衛(wèi)反應(yīng)，因此我們克隆了多個(gè)植物病原細(xì)菌效應(yīng)分子的的靶標(biāo)基因，如AtRin4, AtHSP90, AtSGT1b, AtRAR1, StR3a。通過(guò)酵母雙雜交檢測(cè)，我們發(fā)現(xiàn)AtSGT1

3、b可以與PsAvr1b-sp互作。通過(guò)生物信息學(xué)分析我們?cè)诖蠖挂呙沟募闹髦参锎蠖购捅臼蠠熤袑ふ业搅伺cAtSGT1b具有較高同源性的5個(gè)相似序列Gm SGT01(Glyma01g43150.1)、GmSGT02(Glyma16g29450.1)、GmSGT03(Glyma09g23980.1)、GmSGT04(Glyma10g37440.1)和NbSGT1.1。隨后，我們成功克隆了以上5個(gè)基因，并再次通過(guò)酵母雙雜交技術(shù)證明GmSGT01、

4、GmSGT03可能與PsAvr1b-sp特異互作。
　　 作為植物抗病信號(hào)通路的重要組成部分，MAPK信號(hào)通路成為各類效應(yīng)分子的攻擊目標(biāo)。本文利用馬鈴薯病毒載體PVX系統(tǒng)，在煙草細(xì)胞內(nèi)高效表達(dá)MAPK信號(hào)通路上的一個(gè)關(guān)鍵激酶NbMKK1（Nicotiana Benthamiana），可以引起本氏煙的HR反應(yīng)，而共表達(dá)一些效應(yīng)分子PsAvh331-sp、PsAvh94-sp和PsAvh328-sp可以抑制由其誘導(dǎo)的HR反應(yīng)。根據(jù)這