姜黃素對人食管癌耐藥細胞Eca-109-VCR裸鼠移植瘤的生長及誘導凋亡研究.pdf

1、我國是食管癌高發(fā)區(qū)，對人們的生命健康存在嚴重的威脅，目前食管癌的治療以手術治療為主，結合化療、放療、生物治療為輔的綜合治療原則，由于食管癌早期臨床癥狀不典型，故大部分患者就診時已處于中晚期，因此化療成為食管癌的重要治療方法之一，化療也作為食管癌的術前、術后的重要輔助治療用于臨床，但臨床常用化療藥物存在易產(chǎn)生耐藥性、毒副作用大、不良反應明顯、價格相對昂貴的缺點，因而尋找克服腫瘤細胞耐藥、對機體毒副作用小，價格相對便宜，抗癌活性強的化療藥物

2、成為近幾年國內(nèi)外研究的熱點。姜黃素(Curcumin,Cur)是一種從姜黃科植物的根莖中提取出來的多酚類化合物，研究表明，姜黃素無毒副作用，具有抗炎、抗氧化和抗腫瘤的藥理學功效。隨著研究的深入，還發(fā)現(xiàn)姜黃素可抑制肝癌、肺癌等耐藥腫瘤細胞的生長。通過誘導細胞凋亡是其主要機制之一，但目前姜黃素抗耐藥食管癌的研究國內(nèi)尚未見報道，那么姜黃素能否抑制人多藥耐藥食管癌的體內(nèi)生長，且與誘導腫瘤細胞凋亡是否有關？值得研究。
　　為了探討姜黃素對人

3、耐藥食管癌裸鼠移植瘤的生長抑制作用及其與誘導腫瘤細胞凋亡之間的關聯(lián)，本研究通過建立人食管癌耐藥細胞Eca-109/VCR細胞裸鼠皮下移植瘤模型后，予以隨機分為對照組、長春新堿組、姜黃素組及姜黃素聯(lián)合長春新堿組，動態(tài)檢測各組移植瘤體積，繪制腫瘤生長曲線，20d后處死裸鼠，解剖并取出瘤體，測量瘤體體積及質(zhì)量，計算腫瘤抑制率，將各組腫瘤組織分別進行蘇木素-伊紅(hematoxylin and eosin，HE)染色觀察腫瘤組織基本形態(tài)、原位末

4、端轉(zhuǎn)移酶標記法(TdT-mediated dUTP nick-end labeling，TUNEL)測細胞凋亡、酶聯(lián)免疫吸附試驗檢(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)檢測人Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3的表達水平、應用細胞凋亡PCR基因芯片技術對凋亡通路中84條凋亡相關基因的表達進行檢測。
　　結果發(fā)現(xiàn)，對照組、長春新堿組、姜黃素組、聯(lián)合組的裸鼠瘤體體積和質(zhì)

5、量分別為（1.42±0.26）cm3、(1.23±0.19)cm3、(0.86±0.20)cm3、（0.58±0.16）cm3和（1.34±0.24）g、（1.18±0.21）g、（0.82±0.16）g、（0.52±0.17）g。姜黃素組和聯(lián)合組，裸鼠移植瘤體積和質(zhì)量均明顯小于對照組和長春新堿組，其中尤以聯(lián)合組更明顯(P＜0.05）。長春新堿組、姜黃素組、聯(lián)合組抑瘤率分別為11.94％、38.56％和61.44％。HE染色結果顯示，姜

6、黃素組及聯(lián)合組內(nèi)見大量壞死灶，其中尤以聯(lián)合組明顯。TUNEL染色顯示對照組、長春新堿組、姜黃素組、聯(lián)合組細胞凋亡率分別為(15.25±2.53)％、（18.30±2.34）％、（42.72±1.74）％、（52.36±2.81）％，以聯(lián)合組細胞凋亡率最高。ELISA檢測結果顯示Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3在姜黃素組的含量分別為（7.79±1.48）μg/g、（5.79±1.09）μg/g、（9.05±1.5

7、0）μg/g，在聯(lián)合組含量分別為（9.61±1.43）μg/g、（7.55±1.17）μg/g、（12.09±1.18）μg/g明顯高于對照組(4.50±0.83)μg/g、（3.03±0.33）μg/g、（4.57±0.94）μg/g和長春新堿組（5.23±0.68）μg/g、（3.35±0.60）μg/g、（5.69±0.80）μg/g，差異有統(tǒng)計學意義（均P＜0.05）。細胞凋亡PCR基因芯片檢測結果顯示在與凋亡相關的基因中有8個

8、促凋亡基因(CASP3，CASP8，CASP9，TNFRSF10A，TNFRSF1A，TNFRSF9，TRADD，TP73)表達顯著上調(diào)，1個抗凋亡基因(BCL2A1)表達顯著上調(diào)，同時結果顯示有1個炎性Caspase基因(CASP5)表達顯著下調(diào)。
　　研究結果表明，姜黃素能顯著抑制人食管癌耐藥細胞Eca-109/VCR的生長，與長春新堿聯(lián)合表現(xiàn)為協(xié)同作用，其作用機制可能為通過誘導腫瘤細胞凋亡，進而逆轉(zhuǎn)腫瘤細胞的耐藥。姜黃素有可