PPARβ-NO信號(hào)通路在虎杖苷保護(hù)高糖損傷血管內(nèi)皮依賴性舒張中的作用.pdf

1、目的：探討PPARβ-NO信號(hào)通路在高糖損傷血管內(nèi)皮依賴性舒張中的作用，并觀察虎杖苷（polydatin, PD）的作用及其可能機(jī)制。
　　方法：不同濃度葡萄糖（33,44,55 mmol/L）孵育大鼠胸主動(dòng)脈，以乙酰膽堿（acetylcholine, ACh）的內(nèi)皮依賴性舒張作用為內(nèi)皮功能完整性指標(biāo)，HE染色和電鏡觀察血管組織結(jié)構(gòu)變化，硝酸還原法測(cè)定血管內(nèi)一氧化氮（nitric oxide，NO）含量，并分別利用qRT-PCR和

2、Western blot方法檢測(cè)血管中過(guò)氧化物酶增殖激活受體β（ peroxisome proliferator-activated receptorβ, PPARβ）、內(nèi)皮型一氧化氮合酶（ endothelial nitric oxide synthase, eNOS）和誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase, iNOS）的mRNA和蛋白表達(dá)。
　　為進(jìn)一步確定PPARβ-NO信號(hào)通路

3、的作用，同時(shí)采用PPARβ激動(dòng)劑GW0742（1μmol/L）及其特異性阻斷劑GSK0660（1μmol/L）和NOS阻斷劑L-NAME（10μmol/L）進(jìn)行干預(yù)。另外，加入PD（1,3,10μmol/L）以觀察PD對(duì)高糖損傷血管內(nèi)皮依賴性舒張的作用及其對(duì)PPARβ-NO信號(hào)通路相關(guān)因子的影響。
　　結(jié)果：
　　一、 PPARβ-NO信號(hào)通路在高糖損傷ACh血管內(nèi)皮依賴性舒張中的作用
　　大鼠胸主動(dòng)脈在不同濃度葡萄糖

4、（33,44,55 mmol/L）環(huán)境中孵育6 h后，ACh的內(nèi)皮依賴性舒張作用明顯減弱超過(guò)60％（P＜0.01），提示內(nèi)皮功能受損；組織學(xué)檢查顯示血管內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整性也被破壞；同時(shí)PPARβmRNA和蛋白表達(dá)明顯降低（P＜0.01）， iNOS表達(dá)升高（P＜0.01），eNOS表達(dá)下降（P＜0.01），血管內(nèi) NO含量減少（P＜0.01）；給予PPARβ激動(dòng)劑GW0742后能改善高糖損傷的ACh內(nèi)皮依賴性舒張作用（P＜0

5、.01），減輕內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞的結(jié)構(gòu)損傷，上調(diào)PPARβ和eNOS表達(dá)，減少iNOS表達(dá)，增加NO濃度（P＜0.01）；PPARβ阻斷劑GSK0660和NOS阻斷劑L-NAME均可阻斷GW0742的上述作用（P＜0.01）。
　　二、虎杖苷對(duì)高糖損傷內(nèi)皮依賴性舒張的影響及PPARβ-NO信號(hào)通路的作用
　　PD（1,3,10μmol/L）呈濃度依賴性地改善高糖對(duì)ACh內(nèi)皮依賴性舒張功能的損傷作用（P＜0.01），減輕高糖

6、造成的內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞損傷；同時(shí)上調(diào)血管PPARβ和eNOS的mRNA和蛋白表達(dá)（P＜0.01），降低iNOS表達(dá)（P＜0.01），增加NO濃度（P＜0.01）。PPARβ阻斷劑GSK0660和NOS阻斷劑L-NAME能阻斷PD對(duì)血管舒張功能和結(jié)構(gòu)的改善作用，逆轉(zhuǎn)PD對(duì)PPARβ、eNOS、iNOS表達(dá)和NO的含量的改變（P＜0.01）。
　　結(jié)論：綜上所述，高糖損傷血管內(nèi)皮依賴性舒張作用與PPARβ-NO信號(hào)通路下調(diào)有關(guān)；P