HLA-B基因多態(tài)性在法醫(yī)學中的應用研究.pdf

1、 本研究目的是設計出一組HLA-B基因特異的SNP位點探針，應用PCR-SSOP法和PCR-RFLP法對中國北方漢族人群進行頻率和家系遺傳規(guī)律調查，獲得相關多態(tài)性數據；并將探針應用于原位雜交技術中進行非創(chuàng)傷性產前父權鑒定的嘗試，為HLA-B基因多態(tài)性的進一步應用奠定基礎。 方法: 根據已知HLA-B基因序列和各等位基因堿基變異及頻率分布的資料，設計2條HLA-B序列特異性DNA探針B009-Z和B095-Z。獲得含有第2外顯子

2、和第3外顯子的HLA-B基因目的片段；篩選最佳斑點雜交條件并通過PCR-RFLP、PCRSSP以及DNA序列測定等方法檢驗斑點雜交的靈敏度、穩(wěn)定性和特異性；調查HLA-B基因序列多態(tài)性在中國北方漢族人群中的頻率分布和家系遺傳規(guī)律；應用密度梯度離心法富集孕婦(5例)外周血中的有核細胞，制成細胞甩片，與探針B095-Z進行原位雜交，并結合其丈夫斑點雜交結果進行非創(chuàng)傷性產前父權鑒定的嘗試。 研究表明:B009-Z和B095-Z特異性強、