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文檔簡介
1、目的:
血流動(dòng)力學(xué)引起的血管內(nèi)皮細(xì)胞受損及血管壁結(jié)構(gòu)改變可能是顱內(nèi)動(dòng)脈瘤形成機(jī)制之一。血管內(nèi)皮鈣黏蛋白(VE-cadherin,VE)、P120連環(huán)蛋白(P120catenin,P120ctn)和Kaiso在維持血管內(nèi)皮細(xì)胞間穩(wěn)定性發(fā)揮重要作用。本實(shí)驗(yàn)研究沖擊流場對(duì)人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)VE、P120和Kaiso表達(dá)量的影響。
方法:
將人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞置于我們自行設(shè)計(jì)的T型流動(dòng)腔細(xì)胞培養(yǎng)系
2、統(tǒng)中,建立模擬血管分叉頂點(diǎn)處血流作用下的臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞模型。對(duì)細(xì)胞加載流速250ml/min【相當(dāng)于雷諾數(shù)(Re)=125】穩(wěn)定沖擊流,應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)、免疫熒光技術(shù)和熒光定量PCR技術(shù),觀察不同沖擊時(shí)間下(0小時(shí)、4小時(shí)、6小時(shí)和8小時(shí))VE、P120和Kaiso表達(dá)情況。
結(jié)果:
沖擊點(diǎn)附近的內(nèi)皮細(xì)胞保持融合,無細(xì)胞分離、收縮或脫落等。
免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)測出P120的表達(dá)量隨沖擊時(shí)間的延長而逐漸減少
3、(P<0.05);免疫熒光技術(shù),測出VE和Kaiso的表達(dá)量隨沖擊時(shí)間的延長而逐漸減少(P<0.05)。
熒光定量PCR技術(shù)測出VE、P120和Kaiso隨沖擊時(shí)間的延長而逐漸減少。
結(jié)論:
沖擊流作用下,血管內(nèi)皮細(xì)胞VE、P120和Kaiso表達(dá)的變化早于細(xì)胞形態(tài)的變化。隨沖擊時(shí)間的延長VE、P120、Kaiso的表達(dá)量逐漸減少。表明血流動(dòng)力學(xué)可造成血管內(nèi)皮細(xì)胞VE、P120和Kaiso表達(dá)量的改變,導(dǎo)致
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