芽孢桿菌THO7代謝產(chǎn)物抑菌成分的研究.pdf

1、微生物次生代謝物是天然抗菌活性物質(zhì)的重要來(lái)源。隨著科學(xué)研究的深入發(fā)展，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)的活性代謝化合物越來(lái)越多，面臨的微生物活性物質(zhì)鑒定分析的重復(fù)性問(wèn)題也越來(lái)越多，不利于藥物的研發(fā)。為了探尋新型天然抗菌藥物，許多實(shí)驗(yàn)室將目光轉(zhuǎn)向具備更有希望發(fā)現(xiàn)新抗菌化合物的極端環(huán)境微生物。嗜熱菌作為極端環(huán)境微生物的一種，因其生長(zhǎng)環(huán)境的特殊性，有產(chǎn)生新穎次生代謝物的可能性。
　　本文研究對(duì)象為一株中度嗜熱菌芽孢桿菌TH07，TH07的乙酸乙酯粗提物對(duì)TH

2、08具有拮抗作用。為了鑒定分析抑制TH08生長(zhǎng)的活性化學(xué)成分，研究抑菌機(jī)理，做了以下工作:
　　優(yōu)化TH07菌株的發(fā)酵條件。發(fā)現(xiàn)TH07在28℃和37℃時(shí)不生長(zhǎng)，45℃時(shí)生長(zhǎng)緩慢，當(dāng)溫度為50～65℃時(shí)，溫度與生長(zhǎng)狀況呈現(xiàn)正相關(guān)。應(yīng)用響應(yīng)面設(shè)計(jì)優(yōu)化菌株的生長(zhǎng)條件，得到TH07生長(zhǎng)最好的條件組合:初始培養(yǎng)基pH為9，1000mL錐形瓶的裝液量為381mL,接種量6.37％(V/V)，發(fā)酵溫度55℃，發(fā)酵時(shí)間36h。按照上述條件培養(yǎng)菌

3、株，通過(guò)乙酸乙酯萃取得到TH07的粗提代謝物。
　　粗提代謝物的分離、純化和初步鑒定。采用薄層色譜和高效液相色譜對(duì)粗提代謝物進(jìn)行化學(xué)成分的分離純化，得到3個(gè)單體化合物。利用質(zhì)譜、核磁共振波譜和紅外光譜鑒定結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)它們?yōu)槿N環(huán)二肽:環(huán)Tyr-Pro，環(huán)Val-Pro和環(huán)Phe-Pro?；钚詼y(cè)定結(jié)果顯示這三種化合物對(duì)指示菌TH08均無(wú)抗性作用。通過(guò)制備型液相色譜分離得到的一個(gè)混合組分，對(duì)TH08表現(xiàn)出明顯的抑制作用。采用氣相色譜質(zhì)譜