一株抑制稻瘟菌的解淀粉芽孢桿菌的分離與次生代謝產(chǎn)物成分分析.pdf

1、稻瘟病是影響水稻產(chǎn)量最為嚴(yán)重的病害之一，目前以篩選具有抗性的水稻品種和化學(xué)防治手段相結(jié)合的方法來預(yù)防和治療，隨著人們生活水平的提高，稻瘟病的耐藥性的增強(qiáng)以及抗性品種相關(guān)抗性的降低，利用天然產(chǎn)物或生物農(nóng)藥等防控手段的需求越來越大。
　　1.本研究從抑菌試驗中分離到的一株能夠抑制稻瘟病生長的芽孢桿菌菌株。通過對其次生代謝產(chǎn)物進(jìn)行分離和純化，找到了數(shù)種具有生物活性的天然產(chǎn)物，并測定了其中一種活性物質(zhì)的分子量。希望能夠從其中篩選出具有良好

2、生物活性，成本低廉的新次生代謝產(chǎn)物。
　　2.試驗中分離到5株對稻瘟病有抑制效果的菌株中，選擇了效果最好的一株菌株進(jìn)行研究，并暫命名為Rdx5。經(jīng)形態(tài)學(xué)觀察、淀粉水解酶觀察和基于16SrDNA的系統(tǒng)進(jìn)化樹分析，確認(rèn)該菌株為解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)。
　　3.試驗選用Landy液體培養(yǎng)基對Rdx5進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，發(fā)酵液具有良好的抑制效果，說明活性成分存在于溶液中。同時，我們也做了抗生

3、素敏感性試驗，Rdx5表現(xiàn)出對多種抗生素敏感。
　　4.Rdx5的次生代謝產(chǎn)物中，具有多種對稻瘟病有抑制作用的生物活性物質(zhì)。液相萃取后在氯仿層、甲醇層、水層均有活性。氯仿/丙酮分配和高效液相色譜分析發(fā)現(xiàn)，僅在氯仿萃取層中至少含有三種生物活性物質(zhì)。抑制稻瘟病的次生代謝產(chǎn)物具有良好的熱穩(wěn)定性和紫外線穩(wěn)定性，酸堿穩(wěn)定性較差。利用液相萃取、高效液相色譜技術(shù)，試驗在數(shù)種具有抑菌活性的次生代謝產(chǎn)物中選擇了一種進(jìn)行了分離純化，并最終得到了該生物