一組MicroRNAs在睪丸發(fā)育中的表達(dá)及MicroRNA-125a對(duì)精原干細(xì)胞發(fā)育的調(diào)節(jié).pdf

1、精子發(fā)生過(guò)程是一個(gè)高度復(fù)雜和精密的過(guò)程，起源于精原干細(xì)胞（spermatogonial stem cell，SSCs）自我更新和分化，并受到廣泛的調(diào)節(jié)。MicroRNA在調(diào)節(jié)精子發(fā)生的準(zhǔn)確性和復(fù)雜性上起著至關(guān)重要的作用。
　　通過(guò)熒光定量RT-PCR檢測(cè)了34個(gè)miRNAs在睪丸不同發(fā)育時(shí)期的表達(dá)量，結(jié)果顯示，不同的microRNAs在睪丸發(fā)育中具有不同的表達(dá)模式。大部分 microRNAs睪丸發(fā)育過(guò)程中的表達(dá)具有高度的階段特異性

2、，他們分別在精子發(fā)生的不同時(shí)期起著調(diào)控作用。MiR-125a，miR-322，miR-199b，miR-295等在睪丸發(fā)育過(guò)程中表達(dá)量顯著下降，而miR-34c，miR-29b在睪丸過(guò)程中表達(dá)量顯著上升?；诖私Y(jié)果，我們挑選miR-125a進(jìn)行進(jìn)一步的研究。構(gòu)建miR-125a慢病毒過(guò)表達(dá)和抑制載體并包裝成慢病毒顆粒,然后使該病毒顆粒感染體外培養(yǎng)的SSCs，結(jié)果發(fā)現(xiàn)miR-125a的過(guò)表達(dá)能增加體外培養(yǎng)的SSCs數(shù)目，而miR-125a

3、的抑制則降低體外培養(yǎng)的SSCs數(shù)目。EdU標(biāo)記法和Hoachst33342、PI（碘化丙啶）雙染實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示miR-125a能通過(guò)促進(jìn)體外培養(yǎng)SSCs的增殖、抑制凋亡調(diào)控體外培養(yǎng)SSCs的數(shù)目。通過(guò)軟件預(yù)測(cè)、結(jié)合文獻(xiàn)報(bào)道資料以及實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR和Western blot證明Bak1是miR-125a的一個(gè)靶基因。miR-125a很可能通過(guò)調(diào)控Bak1的表達(dá)抑制體外培養(yǎng)SSCs的凋亡。MicroRNA在精子發(fā)生過(guò)程中功能的闡明能加