四逆湯及其各組分對膿毒癥大鼠炎癥反應(yīng)和免疫功能影響的比較研究.pdf

1、目的:通過腹腔注射LPS建立膿毒癥大鼠動(dòng)物模型，分別予四逆湯及其組方中各味藥灌胃，觀察并比較其對大鼠模型炎性反應(yīng)和免疫功能的影響，探索四逆湯中起主要作用的藥材，以及證實(shí)中藥配伍后的藥效相對于各自單味藥藥效的提升作用，探討其可能機(jī)制。
　　方法:選36只雄性SD大鼠，按隨機(jī)數(shù)字表法分為正常對照組(n=6)、模型組(n=6)、附子組(n=6)、干姜組(n=6)、炙甘草組(n=6)及四逆湯組(n=6)。腹腔注射LPS(5mg/kg)制備

2、膿毒癥大鼠模型。藥物按照《傷寒論》中四逆湯原方比例選取中藥顆粒劑，即附子、干姜、甘草按照5∶3∶2比例配置。除正常對照組及模型組外，其余各組均于制模后立刻予藥物湯劑灌胃（10ml/kg），每12小時(shí)給藥一次。模型組給予等量生理鹽水。正常對照組不予任何處理。分別于制模后2、24、48小時(shí)經(jīng)眼眶采血，采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定膿毒癥大鼠血清HLA-DR、白細(xì)胞介素(IL-1、IL-10)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的表達(dá)水平，

3、并于造模后48小時(shí)，處死大鼠取其肺組織標(biāo)本，染色后觀察其病理改變情況。
　　結(jié)果:在腹腔注射LPS后，各組大鼠IL-1和TNF-α水平均較正常對照組升高(P＜0.01)，而各組大鼠IL-10水平較正常組出現(xiàn)明顯下降(P＜0.01)。造模2h后，各組大鼠IL-1、IL-10和TNF-α水平無明顯差異(P＞0.05)。在24h和48h兩個(gè)節(jié)點(diǎn)，附子組（FZ組）和四逆湯組（SNT組）IL-1和TNF-α水平均較除正常對照組外的其余組下降

4、，且存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，其中SNT組下降幅度明顯優(yōu)于FZ組(P＜0.01)。模型組(NS組)、干姜組（GJ組）和甘草組（GC組）IL-1和TNF-α水平在這兩個(gè)時(shí)間節(jié)點(diǎn)均無明顯差異(P＞0.05)。在24h、48h兩個(gè)節(jié)點(diǎn)，GC組和SNT組IL-10水平均較其余造模的大鼠組升高(P＜0.01)，其中SNT組上升幅度高于GC組(P＜0.05)，NS組、FZ組和GJ組IL-10水平在24h、48h無明顯差異(P＞0.05)。在2

5、h和24h，造模后的各組大鼠HLA-DR水平均較正常組升高，且無差異(P＞0.05)，但到48h，較除正常對照組外的其它組，SNT組HLA-DR水平下降幅度明顯較小，存在明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)，而NS組、FZ組、GJ組、GC組在三個(gè)時(shí)間節(jié)點(diǎn)的HLA-DR水平均無明顯差異(P＞0.05)。肺組織病理結(jié)果示:在造模后48h，SNT組部分肺泡擴(kuò)張融合，而NS組、FZ組、GJ組和GC組肺泡擴(kuò)張融合明顯，并有肺泡隔的增厚和大量炎癥細(xì)胞的浸

6、潤。
　　結(jié)論:四逆湯能夠調(diào)節(jié)機(jī)體全身炎癥反應(yīng)的平衡，具有促進(jìn)血漿中抑炎因子IL-10表達(dá)以及抑制促炎因子IL-1、TNF-α表達(dá)的雙向調(diào)節(jié)作用，可以延緩HLA-DR的下降趨勢，并可以減輕肺組織的炎癥細(xì)胞浸潤，保護(hù)肺泡完整性;附子對血漿中促炎因子IL-1、TNF-α表達(dá)有一定的抑制作用，但對抑炎因子IL-10表達(dá)和肺組織的保護(hù)無明顯作用;甘草對抑炎因子IL-10表達(dá)有一定的上調(diào)作用，但對促炎因子IL-1、TNF-α以及HLA-DR