依托咪酯對膿毒癥大鼠全身炎癥反應(yīng)及腎上腺的影響.pdf

1、背景:膿毒癥是由感染導(dǎo)致細(xì)菌擴(kuò)散入血，細(xì)菌繁殖并產(chǎn)生大量毒素導(dǎo)致機(jī)體器官功能受損。機(jī)體對細(xì)菌病原體及內(nèi)毒素劇烈而過度的免疫反應(yīng)是導(dǎo)致膿毒癥預(yù)后不良的病理基礎(chǔ)。膿毒癥(Sepsis)是外科病人圍術(shù)期常見的并發(fā)癥，也是ICU患者死亡的主要病因之一。腎上腺皮質(zhì)激素具有顯著的抗炎效果，被認(rèn)為有助于治療膿毒癥。靜脈麻醉藥依托咪酯對循環(huán)功能抑制顯著小于丙泊酚等同類麻醉藥，尤其適用于危重患者的麻醉誘導(dǎo)，但它競爭性抑制腎上腺皮質(zhì)激素合成酶CYP11B1

2、，從而抑制腎上腺分泌皮質(zhì)激素，因此臨床上對其是否能安全用于膿毒癥患者的麻醉誘導(dǎo)存在爭議。但是，受炎癥影響膿毒癥下腎上腺功能往往亢進(jìn)，因此，依托咪酯對腎上腺功能抑制是否是導(dǎo)致膿毒癥患者死亡率增加的原因尚未證實(shí);除了腎上腺功能抑制，依托咪酯是否還通過其他機(jī)制對膿毒癥患者產(chǎn)生影響也尚未明確。腫瘤壞死因子α主要是由單核細(xì)胞產(chǎn)生的一種細(xì)胞因子，最初因其能導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞壞死而命名，之后發(fā)現(xiàn)在膿毒癥及膿毒性休時中表達(dá)明顯，可以反映膿毒癥時全身炎癥的程度

3、。因此本實(shí)驗(yàn)擬通過檢測大鼠血清中腫瘤壞死因子α水平的變化來評估依托咪酯對膿毒癥大鼠炎癥程度的影響。
　　目的:本實(shí)驗(yàn)在已建立靜脈通路的大鼠上通過盲腸結(jié)扎穿孔手術(shù)復(fù)制膿毒癥模型，觀察依托咪酯對膿毒癥大鼠生存率的影響，同時探索正常劑量和小劑量的依托咪酯對膿毒癥大鼠全身炎癥反應(yīng)的影響，以及對肺和腎上腺組織的影響。
　　方法:選用雌性SD大鼠(200～240 g)，首先頸外靜脈置管建立靜脈通路，留置靜脈導(dǎo)管并通過皮下隧道牽引至頸后以

4、便在大鼠清醒狀態(tài)下藥物干預(yù)。然后行盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)(CLP)復(fù)制大鼠膿毒癥模型。大鼠隨機(jī)分為4組（每組13只）:假手術(shù)組(Sham);CLP組;ETO_A組，CLP術(shù)后給予依托咪酯(0.6 mg/kg);ETO_B組，CLP術(shù)后給予依托咪酯(1.8mg/kg)。CLP術(shù)后24小時采集動脈血，通過酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定檢測血清中腫瘤壞死因子（TNF-α）;取雙側(cè)腎上腺組織，采用冰凍切片熒光染色法觀察組織壞死凋亡情況，取左肺葉切片

5、HE染色觀察肺損傷程度。每組另外10只大鼠用于觀察術(shù)后7天存活情況繪制生存曲線。
　　結(jié)果:Sham組生存率為100％，CLP組和ETO_A組生存率為60％，ETO_B組為50％。CLP組、ETO_A組和ETO_B組三組間動物生存率比較無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。Sham組、CLP組、ETO_A和ETO_B組血清TNF-α濃度分別是102.84±42.46 pg/mL,1394.15±177.34 pg/mL,449.27±77.73 pg

6、/mL和649.27±97.77pg/mL。CLP組TNF-α水平較Sham組明顯升高，ETO_A和ETO_B組TNF-α水平相對CLP組降低明顯。熒光染色結(jié)果顯示CLP組大鼠腎上腺壞死明顯，ETO_A組壞死程度明顯低于CLP和ETO_B組，Sham組單位視野活細(xì)胞計(jì)數(shù)為1437±163，CLP組、ETO_A組和ETO_B組分別為167±55，610±74和471±52。肺組織切片HE染色觀察各組肺組織炎性病理改變明顯，組間無明顯差異。