出生前DEHP暴露對大鼠下丘腦神經(jīng)細(xì)胞及生殖腺細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的：
　　通過檢測大鼠下丘腦神經(jīng)細(xì)胞及卵巢/睪丸細(xì)胞凋亡相關(guān)基因的相對表達(dá)水平，探討出生前 DEHP暴露對子代大鼠神經(jīng)系統(tǒng)及生殖系統(tǒng)毒性的潛在作用機(jī)制。
　　方法：
　　32只健康SD孕鼠隨機(jī)均分為對照組（玉米油溶劑對照）和2 mg/kg、10 mg/kg、50 mg/kg DEHP染毒組，每組8只。于孕14天（gestation day14，G14)-G19給予孕鼠每天1次灌胃染毒。仔鼠出生后，每窩隨機(jī)選取雌雄大鼠

2、各1只24h內(nèi)處死，其余大鼠由母乳喂養(yǎng)至3周后斷乳并雌雄分籠正常飼養(yǎng)，于10周齡時，每窩隨機(jī)選取雌雄子代大鼠2只，其中1只斷頭處死，另一只多聚甲醛灌流固定后處死。采用實(shí)時熒光定量PCR檢測新生大鼠下丘腦神經(jīng)細(xì)胞、成年大鼠視前區(qū)（preoptic area，POA）組織、成年大鼠卵巢/睪丸組織凋亡相關(guān)基因Bcl-2、Bax、Caspase-3的相對表達(dá)水平，采用TUNEL法檢測成年大鼠POA細(xì)胞凋亡情況。
　　結(jié)果：
　　1.

3、各處理組間子代新生雌性大鼠下丘腦神經(jīng)組織凋亡相關(guān)基因Caspase-3、Bcl-2、Bax表達(dá)水平以及Bcl-2/ Bax比值的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　2.各處理組間子代新生雄性大鼠下丘腦神經(jīng)組織凋亡相關(guān)基因Caspase-3、Bcl-2、Bax表達(dá)水平以及Bcl-2/ Bax比值的差異也均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　3.各處理組間子代成年雌性大鼠POA區(qū)腦組織Bcl-2基因表達(dá)水平的差異無統(tǒng)計學(xué)意

4、義（P>0.05）； Bax基因表達(dá)水平的差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），與對照組相比，2 mg/kg、10 mg/kg劑量組Bax基因表達(dá)水平均下降，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），而50 mg/kg劑量組Bax基因表達(dá)水平與對照組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；各組間Bcl-2/Bax比值的差異也有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），與對照組相比，10 mg/kg劑量組Bcl-2/Bax比值升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）

5、，而2mg/kg和50 mg/kg劑量組Bcl-2/Bax比值與對照組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　4.各處理組間子代成年雄性大鼠POA區(qū)腦組織Bcl-2基因表達(dá)水平的差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），與對照組相比，2 mg/kg、10 mg/kg及50 mg/kg劑量組Bcl-2基因表達(dá)水平均下降，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；各組間Bax基因表達(dá)水平的差異也有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），與對照組相比，2 m

6、g/kg、10 mg/kg及50 mg/kg劑量組Bax基因表達(dá)水平均下降，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；各組間Bcl-2/Bax比值的差異也有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），與對照組相比，2 mg/kg、10 mg/kg劑量組Bcl-2/Bax比值升高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），而50 mg/kg劑量組Bcl-2/Bax比值與對照組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　5.DEHP染毒后成年子代大鼠POA區(qū)腦組

7、織均未檢測到凋亡細(xì)胞。
　　6.各處理組間子代成年雌性大鼠卵巢組織Bcl-2、Bax基因表達(dá)水平以及Bcl-2/ Bax比值的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　7.各處理組間子代成年雄性大鼠睪丸組織Bcl-2、Bax基因表達(dá)水平的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；Bcl-2/Bax比值的差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），與對照組相比，10mg/kg和50 mg/kg劑量組Bcl-2/Bax比值均下降，差異均有統(tǒng)計學(xué)

8、意義（P<0.05），而2mg/kg劑量組Bcl-2/Bax比值與對照組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　結(jié)論：
　　1．本研究條件下，未發(fā)現(xiàn)出生前暴露DEHP對新生子代大鼠下丘腦組織細(xì)胞凋亡相關(guān)基因表達(dá)水平有影響。
　　2．本研究條件下，未發(fā)現(xiàn)出生前暴露DEHP對成年子代大鼠POA腦組織有促細(xì)胞凋亡作用。
　　3．出生前DEHP暴露可降低成年子代雄性大鼠睪丸組織Bcl-2/Bax基因比值，可能對成年后