肺炎鏈球菌自溶素LytA的結(jié)構(gòu)和功能研究.pdf

1、LytA存在于多種鏈球菌中，包括致病菌肺炎鏈球菌、假肺炎鏈球菌和輕型鏈球菌等。由于它在細(xì)菌自溶過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用而得名自溶素。LytA是錨定在細(xì)菌細(xì)胞壁上的肽聚糖水解酶，能夠水解N-乙酰胞壁酸和L-丙氨酸之間的酰胺鍵，但是其激活機(jī)制和發(fā)揮生理功能的分子機(jī)制仍然不清楚。解析了肺炎鏈球菌LytA的全長結(jié)構(gòu)，分辨率為2.1(A)。LytA的全長結(jié)構(gòu)為一個(gè)飛鏢形狀的同源二聚體，其相互作用區(qū)域位于C末端。每個(gè)亞基都包含有一個(gè)N端的酰胺酶結(jié)構(gòu)域和一

2、個(gè)C端的膽堿結(jié)合結(jié)構(gòu)域，其中膽堿結(jié)合結(jié)構(gòu)域有6個(gè)膽堿結(jié)合重復(fù)區(qū)，包括5個(gè)典型的和1個(gè)單層的膽堿結(jié)合位點(diǎn)。LytAN端的酰胺酶結(jié)構(gòu)域上具有一個(gè)Y型的底物結(jié)合溝槽，結(jié)構(gòu)分析結(jié)合生化實(shí)驗(yàn)證明其可能的底物為肺炎鏈球菌細(xì)胞壁的三個(gè)分支:糖鏈、肽鏈和磷壁酸。另外，點(diǎn)突變結(jié)合酶活實(shí)驗(yàn)表明二聚化和所有膽堿結(jié)合位點(diǎn)被膽堿分子完全占據(jù)，才能使LytA具有完全催化活性的構(gòu)象，進(jìn)而使其2個(gè)酰胺酶結(jié)構(gòu)域維持合適的距離來切割肽聚糖上相距103(A)的2個(gè)乳酰-酰胺