中國青島文昌魚TRAF家族基因的發(fā)現(xiàn)及研究.pdf

1、腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子(TRAF)是一個(gè)比較保守的胞內(nèi)銜接蛋白家族。TRAF家族成員都有相似的結(jié)構(gòu)，它們的C端都有一個(gè)保守的結(jié)構(gòu)域，命名為TRAF結(jié)構(gòu)域，除TRAF1外，它們的N端都具有一個(gè)環(huán)指結(jié)構(gòu)和若干個(gè)鋅指結(jié)構(gòu)。TRAFs是胞內(nèi)重要的信號(hào)傳導(dǎo)分子，它們可以與TNFR和IL-1R/TLR家族受體發(fā)生直接或間接的相互作用，以調(diào)節(jié)NF—кB和JNK信號(hào)通路的活性。在這個(gè)過程中，TRAFs可以參與調(diào)節(jié)動(dòng)物體內(nèi)多種生物功能，如胚胎發(fā)育過程、

2、天然免疫及適應(yīng)性免疫反應(yīng)等。 在中國青島文昌魚中，我們克隆得到了四個(gè)TRAF家族成員，分別命名為BbtTRAF2、3、4、6。系統(tǒng)發(fā)生分析顯示，我們克隆得到的四個(gè)BbtTRAFs與它們?cè)诩棺祫?dòng)物中相應(yīng)的TRAF2、3、4、6基因是直系同源的基因。Southern雜交及基因組結(jié)構(gòu)比較分析顯示文昌魚TRAF家族呈現(xiàn)一種多拷貝及結(jié)構(gòu)多態(tài)性的狀態(tài)，說明文昌魚中的TRAF家族正處于一個(gè)變化活躍的時(shí)期。通過Real-time PCR及原位雜

3、交的方法發(fā)現(xiàn)，BbtTRAF2、3、4、6在文昌魚胚胎發(fā)育時(shí)期表現(xiàn)出各自不同的表達(dá)模式，但在成體文昌魚中，它們的表達(dá)都集中在文昌魚消化道中。另外，在LPS感染刺激后，BbtTRAF3的表達(dá)量在刺激后8小時(shí)時(shí)上升到50倍，BbtTRAF2、6在刺激后表達(dá)量增加的幅度不是很大，而BbtTRAF4的表達(dá)量則基本沒有變化。最后，在NF—KB報(bào)告基因熒光素酶檢測(cè)中發(fā)現(xiàn)BbtTRAF6在HEK293T細(xì)胞中可以激活NF—KB，BbtTRAF4只有較

4、弱的激活作用，而BbtTRAF2、3則沒有影響NF—KB的作用。 總結(jié)以上所有結(jié)果，TRAF家族在進(jìn)化過程中是非常保守的。文昌魚中的TRAF家族正處于無脊椎動(dòng)物向脊椎動(dòng)物進(jìn)化的過渡階段，這一時(shí)期表現(xiàn)出的多拷貝及多態(tài)性對(duì)該家族在以后的進(jìn)化中成員及功能的增加是非常重要的。文昌魚中的TRAF家族可能與它們?cè)谄渌锓N中的同源基因一樣，具有多種多樣的生物功能，但是它們有著自己獨(dú)特的作用過程，例如不同的信號(hào)通路，不同的相互作用分子等。我們對(duì)