CREB3L1和PTN在人腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、目的:人腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤，簡稱腦膠質(zhì)瘤(glioma of brain)，是發(fā)生于神經(jīng)外胚層組織的腫瘤，故亦稱神經(jīng)外胚層腫瘤或神經(jīng)上皮腫瘤。膠質(zhì)瘤占顱內(nèi)腫瘤40％～50％，由于其惡性程度高并且呈浸潤性生長，所以導(dǎo)致手術(shù)難以全部切除，術(shù)后復(fù)發(fā)率高，總體預(yù)后不良，平均生存期為1年，術(shù)后放療和化療可延長生命，但是不能治愈。如何提高膠質(zhì)瘤的治療效果，是神經(jīng)外科最富挑戰(zhàn)性而又亟待解決的問題。神經(jīng)膠質(zhì)瘤的常規(guī)治療手段是手術(shù)切除加上放療和化療。近年來，免

2、疫治療、抗血管形成及基因治療等新療法也開始從實(shí)驗(yàn)研究向臨床應(yīng)用過渡。然而，任何單一的手段都難以達(dá)到真正的治愈，特別是廣泛浸潤性生長的惡性膠質(zhì)瘤。因此，探索膠質(zhì)瘤的發(fā)病機(jī)制，尋找新的治療手段，提高膠質(zhì)瘤的治療效果已經(jīng)迫不及待。
　　癌基因與抑癌基因的相互作用及細(xì)胞增殖與凋亡的平衡，決定了腫瘤生物學(xué)行為的發(fā)生與發(fā)展程度，目前研究較多的是CREB3L1和PTN在肺癌、胃癌、結(jié)腸癌、前列腺癌中的表達(dá)情況，而在人腦膠質(zhì)瘤中的研究還比較少。C

3、REB3L1是近年來新發(fā)現(xiàn)的重要的轉(zhuǎn)錄因子，在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激狀態(tài)下UPR通路被激活后CREB3L1形成效應(yīng)片段進(jìn)入細(xì)胞核，通過結(jié)合cAMP反應(yīng)元件作用于目的基因，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡，抑制細(xì)胞有絲分裂。CREB3L1目的基因主要包括細(xì)胞凋亡基因GADD153、c-JUN、caspase-3及細(xì)胞循環(huán)抑制因子p21、p27、p16。PTN是一種分泌性的肝素結(jié)合生長因子，可與跨膜蛋白酪氨酸磷酸酶受體(RPTPζ)、間變性淋巴瘤激酶受體(ALK)等

4、多種受體結(jié)合后，激活細(xì)胞骨架重構(gòu)相關(guān)通路和細(xì)胞增殖、存活、抗凋亡相關(guān)通路，誘導(dǎo)腫瘤血管形成及過度增殖，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤的發(fā)生與發(fā)展。腦膠質(zhì)瘤是顱內(nèi)最常見的腫瘤，深入了解腦膠質(zhì)瘤中CREB3L1與PTN的表達(dá)及其與腦膠質(zhì)瘤臨床病理分型之間的關(guān)系，可能為腦膠質(zhì)瘤的診斷、治療、預(yù)后提供一條新途徑。
　　通過免疫組織化學(xué)染色方法(IHC)和實(shí)時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)方法對正常腦組織和不同級別膠質(zhì)瘤組織中CREB3L1和P

5、TN的表達(dá)進(jìn)行檢測，探討CREB3L1和PTN在膠質(zhì)瘤發(fā)生、發(fā)展中的作用及其與臨床病理分型之間的關(guān)系，從而為膠質(zhì)瘤的診斷、治療提供線索及依據(jù)。
　　方法:收集于河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院神經(jīng)外科2014年2月至2014年6月期間行手術(shù)切除的人腦膠質(zhì)瘤標(biāo)本42例，按照WHO2007年中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分類:Ⅰ～Ⅱ級為低級別膠質(zhì)瘤，共17例，Ⅲ～Ⅳ級為高級別膠質(zhì)瘤，共25例，均經(jīng)本院病理科證實(shí)并且有完整病歷資料，另取9例因腦外傷或者腦出血而行

6、顱內(nèi)減壓手術(shù)的正常人腦組織標(biāo)本作為對照，膠質(zhì)瘤患者于手術(shù)前均未接受放化療等抗腫瘤治療。每一個標(biāo)本均在手術(shù)切除后立即置于10％福爾馬林中固定和液氮中保存，采用免疫組織化學(xué)法(IHC)和qRT-PCR法分別測定CREB3L1及PTN的蛋白和mRNA在膠質(zhì)瘤和正常腦組織中的表達(dá)水平，免疫組化結(jié)果采用免疫積分打分法IRS（即染色強(qiáng)度和陽性細(xì)胞百分比乘積）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，qRT-PCR原始檢測結(jié)果按照2-△△ct相對定量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS13

7、.0對實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果:
　　1、免疫組化結(jié)果顯示:CREB3L1在正常腦組織和低、高級別膠質(zhì)瘤三組間表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，陽性率分別為100％、76％、40％，低級別膠質(zhì)瘤組中CREB3L1表達(dá)水平顯著低于正常腦組織組(P＜0.05)，高級別膠質(zhì)瘤組中CREB3L1表達(dá)水平顯著低于低級別膠質(zhì)瘤組與正常腦組織組(P＜0.05); PTN在三組間表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，陽性率分

8、別為11％、82％、100％，低級別膠質(zhì)瘤組中PTN表達(dá)水平顯著高于正常腦組織組(P＜0.05)，高級別膠質(zhì)瘤組中PTN表達(dá)水平顯著高于低級別膠質(zhì)瘤組與正常腦組織組(P＜0.05)。CREB3L1與PTN在正常腦組織、低級別和高級別膠質(zhì)瘤三組表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.29，P=0.039)。
　　2、qRT-PCT結(jié)果顯示:CREB3L1 mRNA在正常腦組織和低、高級別膠質(zhì)瘤三組間表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，低級別膠質(zhì)瘤

9、組中CREB3L1 mRNA的表達(dá)水平顯著低于正常腦組織組(P＜0.05)，高級別膠質(zhì)瘤組中CREB3L1 mRNA的表達(dá)水平顯著低于低級別膠質(zhì)瘤組與正常腦組織組(P＜0.05); PTN mRNA在三組間表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，低級別膠質(zhì)瘤組中PTN mRNA的表達(dá)水平顯著高于正常腦組織組(P＜0.05)，高級別膠質(zhì)瘤組中PTN mRNA的表達(dá)水平顯著高于低級別膠質(zhì)瘤組與正常腦組織組(P＜0.05)。CREB3L1 mR

10、NA與PTN mRNA在正常腦組織、低級別和高級別膠質(zhì)瘤三組表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.497，P=0.000)。
　　結(jié)論:
　　1、CREB3L1的表達(dá)水平與膠質(zhì)瘤的惡性級別呈負(fù)相關(guān)，CREB3L1的表達(dá)下調(diào)與膠質(zhì)瘤的惡性進(jìn)演關(guān)系密切。
　　2、PTN的表達(dá)水平與膠質(zhì)瘤的惡性級別呈正相關(guān)，PTN的表達(dá)上調(diào)與膠質(zhì)瘤的腫瘤生物學(xué)行為關(guān)系緊密。
　　3、CREB3L1和PTN可能成為膠質(zhì)瘤的生物學(xué)指標(biāo)及靶向治療的新方向