中藥干預(yù)對(duì)慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虛證和脾胃濕熱證患者microRNA表達(dá)的影響.pdf

1、目的：
　　觀察中藥干預(yù)慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虛證和脾胃濕熱證患者的臨床療效，為中醫(yī)藥有效防治慢性乙型病毒性肝炎提供臨床研究依據(jù)。同時(shí)，檢測(cè)中藥干預(yù)后慢性乙型病毒性肝炎兩證型相關(guān)microRNAs表達(dá)水平的變化，從microRNA層面探討中醫(yī)辨證治療慢性乙型病毒性肝炎的作用機(jī)制以及中藥治療的作用靶點(diǎn)，為中藥臨床療效評(píng)價(jià)提供生物學(xué)依據(jù)。
　　方法：
　　本研究將納入的慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虛證和脾胃濕熱證患者分別隨機(jī)

2、分為對(duì)照組和治療組。兩證型對(duì)照組均使用拉米夫定常規(guī)治療，治療組在使用拉米夫定治療的基礎(chǔ)上，肝郁脾虛證、脾胃濕熱證予以中藥干預(yù)，于治療第0、3、6、9、12、15、18個(gè)月檢測(cè)患者ALT、TBIL及HBV-DNA。并從中篩選出未發(fā)生耐藥突變的肝郁脾虛證和脾胃濕熱證患者各6例，其中治療組和對(duì)照組各3例患者，以及健康志愿者3例，共15例，采用qRT-PCR(探針?lè)?檢測(cè)肝郁脾虛證治療前及治療后第6個(gè)月的血漿miR-23a-3p表達(dá)水平，以及脾

3、胃濕熱證治療前及治療后第6個(gè)月的血漿miR-1280表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　1.慢性乙型病毒性肝炎患者HBV-DNA水平與年齡呈負(fù)相關(guān)（r=-0.197,P=0.000）。
　　2.治療前，脾胃濕熱證患者ALT水平較肝郁脾虛證者高，ALT≥3×ULN者分別占脾胃濕熱證、肝郁脾虛證總例數(shù)的38％和30%。
　　3.肝郁脾虛證患者治療后各時(shí)間檢測(cè)點(diǎn)ALT、TBIL、HBV-DNA均較治療前明顯下降，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)

4、意義（P<0.05)。治療后對(duì)照組（西藥組）與治療組（中藥加西藥組）比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），但治療組治療后ALT、TBIL、HBV-DNA總體水平低于對(duì)照組，且隨時(shí)間推移治療組病情更穩(wěn)定，無(wú)明顯的反彈現(xiàn)象。
　　4.脾胃濕熱證患者治療后各時(shí)間檢測(cè)點(diǎn)ALT、TBIL、HBV-DNA較治療前明顯下降，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。治療后治療組與對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），但治療組治療后ALT、T

5、BIL、HBV-DNA總體水平低于對(duì)照組，隨時(shí)間的推移治療組病情更穩(wěn)定，且無(wú)明顯的反彈現(xiàn)象。
　　5.納入總病例中，治療組拉米夫定耐藥突變率顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。肝郁脾虛證中，治療組耐藥突變率較對(duì)照組低，兩組耐藥突變率為分別為18.6%和32.3%；脾胃濕熱證中，治療組耐藥突變率較對(duì)照組低，兩組耐藥突變率分別為4.1%和13.8%。
　　6.與正常人比較，慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虛證患者miR-23a-3p表達(dá)降低

6、，治療后，治療組miR-23a-3p表達(dá)水平較治療前顯著升高（P<0.05）；對(duì)照組治療前后miR-23a-3p表達(dá)水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　7.與正常人比較，慢性乙型病毒性肝炎脾胃濕熱證患者miR-1280表達(dá)降低。治療后，治療組miR-1280表達(dá)水平較治療前顯著升高（P<0.05）；對(duì)照組治療前后miR-1280表達(dá)水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.慢性乙型

7、病毒性肝炎患者HBV-DNA水平與其年齡呈負(fù)相關(guān)，隨著年齡的增長(zhǎng)而下降。
　　2.中藥聯(lián)合拉米夫定治療慢性乙型病毒性肝炎較單純拉米夫定治療能更有效地改善患者肝功能，抑制病毒復(fù)制，降低HBV耐藥突變率，使病情更穩(wěn)定。
　　3.miR-23a-3p、miR-1280分別與中藥干預(yù)后慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虛證和脾胃濕熱證患者的病情演變相關(guān)。
　　4.miRNA表達(dá)水平與中藥干預(yù)后療效的相關(guān)性，進(jìn)一步證明了miR-23a-3