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1、以大豆胰蛋白酶抑制劑為配基,Sepharose-4B為載體的親和層析從赤子愛勝蚓(Eisenia foetida)勻漿液中分離出了蚯蚓纖溶酶全組分,用DEAE-Cellulose-52離子交換層析法和制備電泳法分離純化了蚯蚓纖溶酶各單組分(其中EfP-Ⅲ-1,EfP-Ⅲ-2為待研究目的組分),ConA轉(zhuǎn)移印跡和LCA,AAL點(diǎn)印跡法證明EfP-Ⅲ-1,EfP-Ⅲ-2的寡糖鏈都含有甘露糖和核心巖藻糖結(jié)構(gòu),EfP-Ⅲ-1,EfP-Ⅲ-2經(jīng)三
2、氟甲基磺酸(TFMS)去糖基化后失去了抵抗胰蛋白酶水解的能力。
分別以TFMS去糖基化前后的蚯蚓纖溶酶全組分為抗原免疫家兔,通過酶聯(lián)免疫法和轉(zhuǎn)移印跡法證明兩種抗原的免疫原性和免疫反應(yīng)性均沒有明顯的差異。
以小分子可逆抑制劑苯甲脒抑制EfP-Ⅲ-1,EfP-Ⅲ-2的活性,通過纖維蛋白平板法測(cè)得苯甲脒對(duì)EfP-Ⅲ-1,EfP-Ⅲ-2的半數(shù)抑制劑量I50分別為2.03μmol和1.48μmol。以6mol/L尿素為
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