低氧致持續(xù)性肺動脈高壓新生鼠PPAR-γ表達及其與肺血管重構關系的研究.pdf

1、目的:
　　肺血管重構是低氧持續(xù)性肺動脈高壓的病理基礎，有報道指出PPAR-γ（Peroxisome proliferator-activated receptor-γ）在肺血管功能中發(fā)揮重要作用。本研究在低氧模型基礎上研究PPAR-γ在低氧持續(xù)性肺動脈高壓發(fā)病機制中的作用及PPAR-γ與肺血管重構的關系。
　　方法:
　　一、動物模型
　　新生SD大鼠隨機分配入低氧組和對照組，各40只。低氧下建立持續(xù)性肺動脈高

2、壓模型。模型組置于低氧環(huán)境中(10-12％ O2)，對照組置于空氣中(21％ O2)，兩組間每24小時交換一次母鼠。
　　二、右心室壓力的測定及右心室肥厚程度的評估
　　兩組分別于實驗14天取同日齡新生大鼠各8只，水合氯醛腹腔注射麻醉后，固定在手術臺上，行氣管插管，接小動物呼吸機，右心室連接壓力傳感器，記錄每一次的血流動力學指標，每次測量前均應調(diào)零，隨后放血處死，減去心房和游離的大血管，沿著房室間隔剪下右心室壁，分別稱量右心

3、室、左心室和室間隔的重量。通過計算右心室與左心室及室間隔的重量之比來檢測右心室肥厚程度。
　　三、肺血管變化的檢測
　　于實驗3天、5天、7天和14天，應用HE染色及α-SMA的免疫組織化學染色后，通過光學顯微鏡觀察每一組肺小動脈形態(tài)變化，并測定肺血管中層厚度與血管外徑之比(Intima-media thickness/external diameter ratio MT)和肺血管中層橫截面積與總橫截面積之比(medial

4、wall cross sectional area/vessel total cross-sectionalarea ratio MA)。
　　四、肺組織中PPAR-γ表達變化的檢測
　　在實驗3天、5天、7天和14天，分別應用免疫組織化學、Westen bloting技術和Real Time PCR檢測肺組織中PPAR-γ的表達變化。
　　結果:
　　一、右心室壓力的測定及右心室肥厚程度的檢測
　　與對照

5、組相比，實驗14天時，模型組右心室壓力明顯升高，右心室與左心室及室間隔之比明顯升高，兩組間有統(tǒng)計學意義。
　　二、肺血管變化的評估
　　與照組相比，模型組在實驗7、14天時，MT和MA均明顯升高。α-SMA在正常肺組織中主要表達于細支氣管和終末細支氣管以及伴行的肺血管，在肺泡血管中表達較少或是沒有。模型組低氧3、5天時，α-SMA亦主要表達于細支氣管和終末細支氣管以及伴行的肺血管，腺泡管伴行的肺小動脈管壁α-SMA表達與對照

6、組相比無明顯差異，但在低氧7天時，腺泡管伴行的肺小動脈管壁出現(xiàn)α-SMA表達量出現(xiàn)升高。隨著低氧時間的延長，肺泡內(nèi)動脈管壁的α-SMA陽性染色細胞逐漸增多，尤以伴行腺泡管的小動脈管壁表達升高幅度較明顯。低氧14天時可以明顯看到肺泡內(nèi)動脈管壁α-SMA表達。
　　三、肺組織中PPAR-γ表達變化的檢測
　　在對照組中，PPAR-γ在肺組織中主要表達于肺血管內(nèi)皮細胞、平滑肌細胞及肺泡上皮細胞，在模型組中，隨著低氧時間的延長，PP

7、AR-γ在肺血管壁上的表達呈下降趨勢。在實驗5天、7天和14天，其肺組織PPAR-γ mRNA表達水平、蛋白表達水平與對照組相比均明顯下降。
　　結論:
　　低氧誘導新生大鼠肺血管管壁增厚，管腔狹窄，非肌型小血管肌化，逐漸形成肺動脈高壓。 PPAR-γ表達于大鼠肺組織中，在慢性低氧條件下，隨著低氧暴露時間的延長呈下降趨勢，而肺血管重構卻逐漸明顯，并且PPAR-γ變化的時間早于肺血管重構出現(xiàn)的時間，說明PPAR-γ可能參與抑制