基于腦腸互動(dòng)研究大黃治療大鼠腦出血的抗炎機(jī)制.pdf

1、目的:本研究運(yùn)用實(shí)驗(yàn)大鼠制造腦出血模型，選用中藥大黃作為處理因素，通過(guò)觀察檢測(cè)其對(duì)腦出血大鼠神經(jīng)功能缺損、腦水腫程度、腸道動(dòng)力功能、炎癥反應(yīng)水平以及腦腸肽表達(dá)的干預(yù)作用，積極探討中藥大黃治療腦出血的抗炎機(jī)制。
　　方法:將健康SD大鼠隨機(jī)分正常組、假手術(shù)組、模型組和大黃組四組，每組又分為24h、72h、120h三個(gè)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行指標(biāo)檢測(cè)。以大鼠作為研究模型，采用自體血注入法模擬大鼠自發(fā)腦出血。正常組正常飲食，無(wú)造模過(guò)程;假手術(shù)組，針體

2、刺入但不注血，模型組和大黃組完成腦出血造模。大黃組按體重予生大黃濃煎液灌胃，余各組按體重使用蒸餾水灌胃，每天一次，持續(xù)5天。在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)觀測(cè)神經(jīng)功能行為學(xué)評(píng)分，采集記錄排便情況，采用Billiot公式測(cè)定腦組織含水量，使用多導(dǎo)生理記錄儀測(cè)定腸道動(dòng)力，運(yùn)用蛋白免疫印跡法、酶聯(lián)免疫吸附法、免疫組化法檢測(cè)炎癥反應(yīng)水平及腦腸肽表達(dá)情況。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，多組間數(shù)據(jù)比較采用單因素方差分析(One-way ANOVA

3、)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，以P＜0.05作為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的標(biāo)準(zhǔn)。
　　結(jié)果:1.神經(jīng)功能缺損評(píng)分:采用Longa評(píng)分法和平衡木評(píng)分法，正常組和假手術(shù)組各時(shí)間點(diǎn)評(píng)分為0，大黃組和模型組各時(shí)間點(diǎn)得分均較假手術(shù)組高，術(shù)后0h評(píng)分最高，之后逐漸降低，造模后0h、24h兩組神經(jīng)功能缺損評(píng)分無(wú)明顯差異，但在72h和120h的神經(jīng)功能評(píng)分明顯低于模型組（P均＜0.05）。2.腸道動(dòng)力功能:腦出血急性期24h內(nèi)大鼠排便粒數(shù)較正常組組明顯減少(p＜0.0

4、1)，大黃組排便粒數(shù)明顯多于模型組(p＜0.05)。各時(shí)間點(diǎn)正常組與假手術(shù)組腸段活力檢測(cè)值均無(wú)明顯差異(p＞0.05)，各模型組較正常組腸段活力檢測(cè)值均有下降(p＜0.01)，腦出血后24h模型組腸段活力檢測(cè)值最低，此后逐漸增加;大黃組72h、120h測(cè)得活力值均較模型組明顯增加(p＜0.05)。3.腦含水量:與假手術(shù)組相比，模型組各時(shí)間點(diǎn)腦組織含水量都有升高（p均＜0.01），72h達(dá)到高峰。隨時(shí)間延長(zhǎng)，模型組和大黃組腦組織含水量均呈

5、下降趨勢(shì)。與模型組相比，大黃組給藥后72h(p=0.043，p＜0.05)、120h(p＜0.01)腦組織含水量顯著減少，在120h時(shí)其含水量接進(jìn)正常組組(p＞0.05)。4.腦組織、腸組織、血清炎癥反應(yīng)水平:Western Blot檢測(cè)腦組織磷酸化NF-κB蛋白表達(dá)結(jié)果顯示，假手術(shù)組與正常組無(wú)明顯差異(p＞0.05)，腦出血后24h模型組和大黃組腦組織表達(dá)量明顯高于假手術(shù)組，24、72h、120h大黃組明顯低于模型組（p均＜0.05）

6、。ELISA檢測(cè)腦組織中TNF-α、IL-1β較假手術(shù)組明顯增高，24h大黃組較模型組IL-1β表達(dá)降低(p＜0.05)，72h、120h大黃組較模型組TNF-α、IL-1β表達(dá)明顯降低(p＜0.01)。ELISA檢測(cè)腸組織模型組各時(shí)間點(diǎn)TNF-α、IL-1β表達(dá)水平較假手術(shù)組升高且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p＜0.01)，24h大黃組較假手術(shù)組IL-1β表達(dá)降低(p＜0.05)，72h、120h較模型組TNF-α、IL-1β表達(dá)明顯降低(p＜

7、0.01)。ELISA檢測(cè)血清結(jié)果發(fā)現(xiàn)，各時(shí)間點(diǎn)血清TNF-α、IL-1β表達(dá)水平較假手術(shù)組升高且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p＜0.01)，大黃組與模型組各時(shí)間點(diǎn)比較均明顯降低(p＜0.05)。5.檢測(cè)發(fā)現(xiàn)24h、120h各組CCK-8表達(dá)無(wú)明顯差異，72h大黃組表達(dá)量較假手術(shù)組升高(p＜0.05)，較模型組明顯升高(p＜0.05)。檢測(cè)腸組織CCK-8含量，發(fā)現(xiàn)72h大黃組較模型組明顯升高(p＜0.01)，24h、120h無(wú)明顯差異。