基于ERK1-2和p38MAPK探討黃葵總黃酮對克羅恩病模型小鼠的治療作用及其機(jī)制.pdf

1、目的:克羅恩病(Crohn's disease，CD)是炎癥性腸病的一種，主要表現(xiàn)為腸道的慢性非特異性炎癥，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究尚未證實(shí)其病因，是臨床治療難點(diǎn)之一。我們前期研究證實(shí)黃葵總黃酮對CD有效，但其具體作用機(jī)制還不明確。本文利用不同劑量的黃葵總黃酮(TotalFlavones of Ambrette，TFA)干預(yù)CD模型小鼠，研究其對模型小鼠的作用及對結(jié)腸組織中細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶1/2（extracellular signal-regu

2、lated kinase1/2，ERK1/2）和p38絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPK)表達(dá)的影響，探討黃葵總黃酮治療CD的效果及其作用機(jī)制。
　　方法:將雌性BALB/c小鼠隨機(jī)分為正常組、模型組、柳氮磺胺吡啶組、黃葵總黃酮低劑量組、黃葵總黃酮中劑量組及黃葵總黃酮高劑量組。其中除正常組外其余各組參照文獻(xiàn)采用TNBS聯(lián)合乙醇涂抹皮膚加多次灌腸法進(jìn)行造模，造模與給藥同時進(jìn)

3、行。實(shí)驗(yàn)過程中記錄小鼠疾病活動指數(shù)，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時取結(jié)腸組織稱重并測量長度，觀察結(jié)腸組織病變情況，應(yīng)用Western Blot法檢測結(jié)腸組織中ERK1/2、P-ERK1/2、p38MAPK及P-p38MAPK的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:
　　1.第一周正常組、模型組與各治療組DAI之間差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。第二周模型組以及各治療組DAI較正常組明顯升高(P＜0.01)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義;模型組與各治療組之間，差異沒有統(tǒng)

4、計學(xué)意義(P＞0.05)。第三周，柳氮磺吡啶組與TFA中劑量組DAI較模型組下降(P＜0.05)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義;其余治療組與模型組之間均未見明顯差異。第四周，僅有TFA高劑量DAI比模型組降低(P＜0.01)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義;模型組與其余各治療組之間均無明顯差異。
　　2.模型組小鼠結(jié)腸重量長度比值明顯高于對照組(P＜0.01)和各給藥組(P＜0.05)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。各給藥組之間比較，差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)

5、。
　　3.模型組小鼠病理評較正常組升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);SASP組、TFA低劑量組與模型組病理評分相比，差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05); TFA中劑量組、TFA高劑量組病理學(xué)評分低于模型組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　4.利用Western blotting檢測結(jié)腸組織胞漿蛋白中p38、P-p38、ERK1/2、P-ERK1/2以及內(nèi)參tublin的表達(dá)情況，分析相應(yīng)條帶灰度值以代替其含量

6、。與正常組相比，模型組結(jié)腸組織胞漿蛋白中ERK1/2含量較低(P＜0.05)，P-ERK1/2較高(P＜0.01);而p38以及P-p38含量均較高(P＜0.01)。與模型組相比，SASP組ERK1/2、P-ERK1/2含量均沒有明顯差異，p38和P-p38含量均顯著低于模型組(P＜0.01)。TFA低劑量與模型組相比，結(jié)腸組織中ERK1/2含量較低(P＜0.01)，而P-ERK1/2含量顯著高于模型組(P＜0.01); P-p38含量

7、較低，p38含量則沒有顯著差異。TFA中劑量與模型組相比，ERK1/2、p38含量沒有統(tǒng)計學(xué)差異，而P-ERK1/2和P-p38的含量均低于模型組(P＜0.05)。TFA高劑量在ERK1/2、P-ERK1/2的含量上與模型組沒有顯著差異，而p38、和P-p38的含量則均低于模型組(P＜0.01)。
　　結(jié)論:黃葵總黃酮對CD模型小鼠有效，能降低模型小鼠的疾病活動指數(shù)、結(jié)腸重量長度比及病理評分，改善臨床癥狀。其作用機(jī)制可能與結(jié)腸組織