潰結(jié)康對(duì)TNBS誘導(dǎo)大鼠克羅恩病模型的治療作用.pdf

1、目的：通過觀察不同濃度的三硝基苯磺酸（TNBS）誘導(dǎo)的大鼠克羅恩病模型，確定最佳造模濃度及造模條件。觀察潰結(jié)康不同劑量及不同給藥途徑對(duì)TNBS誘導(dǎo)的克羅恩病模型的治療作用。通過觀察記錄大鼠進(jìn)食、毛色、活動(dòng)情況和體重增長情況，大便性狀，結(jié)腸大體標(biāo)本，腸粘膜損傷與修復(fù)等情況，以明確潰結(jié)康對(duì)克羅恩病的作用，為該藥物應(yīng)用于克羅恩病治療提供試驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：
　　1. TNBS誘導(dǎo)的克羅恩病大鼠模型建立。通過給予不同濃度的TNBS

2、誘導(dǎo)的克羅恩病大鼠模型以確定最佳造模濃度。將14只大鼠隨機(jī)分為TNBS低劑量造模組4只、TNBS中劑量造模組4只、TNBS高劑量造模組4只和正常組2只，雌雄各半。通過觀察大鼠飲食、體重、毛色和精神狀態(tài)等一般臨床情況，觀察糞便情況（便潛血、血便、腹瀉）。2周后處死取結(jié)腸組織，觀察大鼠結(jié)腸組織損傷情況，證實(shí)克羅恩病形成。
　　2.分組：將72只大鼠隨機(jī)分為12組，每組6只，雌雄各半。分別為灌胃組：包括灌胃正常組、灌胃模型組、灌胃陽性對(duì)

3、照藥物（美沙拉嗪）組、灌胃受試藥物高、中、低劑量組；灌腸組：包括灌腸正常組、灌腸模型組、灌腸陽性對(duì)照藥物（美沙拉嗪）組、灌腸受試藥物高、中、低劑量組。
　　3.藥物治療：大鼠造模前24小時(shí)禁食不禁水，造模24小時(shí)后開始給予不同濃度受試藥物或相同體積的0.9％氯化鈉注射液進(jìn)行干預(yù)。每天1次，連續(xù)21天，末次給藥后繼續(xù)觀察24小時(shí)。
　　4.療效評(píng)價(jià)：每天觀察大鼠的體重、飲食、毛色和精神狀態(tài)等一般癥狀，觀察是否出現(xiàn)腹瀉、便潛血陽

4、性，并對(duì)疾病活動(dòng)指數(shù)（DAI）進(jìn)行評(píng)分。試驗(yàn)結(jié)束后記錄潰結(jié)康灌腸給藥或灌胃給藥對(duì)大鼠血清干擾素-γ（IFN-γ）、腸粘膜中谷氨酰胺（Gln）、白介素-l（IL-1）、白介素-4（IL-4）和白介素-10（IL-10）的含量的影響，并觀察藥物對(duì)大鼠結(jié)腸組織損傷評(píng)分以及病理學(xué)的影響，與正常組、模型組和陽性對(duì)照藥物（美沙拉嗪）組進(jìn)行比較。
　　結(jié)果：
　　1. TNBS誘導(dǎo)的克羅恩病模型可引起大鼠體重下降，肉眼血便或便潛血陽性，

5、DAI評(píng)分增高，觀察結(jié)腸大體標(biāo)本形態(tài)，腸粘膜損傷等情況，證實(shí)TNBS灌腸造?？梢哉T導(dǎo)克羅恩病形成。以100mg/kg（3mL/kg）低劑量造模后，4天后癥狀趨向好轉(zhuǎn)，于6~8天后大便已基本成型，肉眼觀察未見粘液和血便。至2周末解剖時(shí)，其中一只大鼠結(jié)腸已逐漸自我痊愈。以125mg/kg（3.75mL/kg）中劑量造模后，大鼠無死亡例數(shù)，且2周后無自愈情況出現(xiàn)。以150mg/kg（4.5mL/kg）高劑量造模后，大鼠死亡率較高。故而選擇12

6、5mg/kg為TNBS誘導(dǎo)的克羅恩病模型的造模濃度。
　　2.潰結(jié)康不同劑量組灌腸或灌胃給藥均可改善 TNBS誘導(dǎo)的大鼠克羅恩病引起的DAI評(píng)分增高以及降低血清IFN-γ，IL-1水平，升高腸粘膜Gln，緩解克羅恩病組織學(xué)變化，其中尤以潰結(jié)康高劑量灌腸給藥作用更為明顯。
　　3.潰結(jié)康灌腸給藥作用更為明顯，優(yōu)于灌胃給藥方式。
　　結(jié)論：本研究通過觀察不同濃度的 TNBS誘導(dǎo)的克羅恩病大鼠模型，證實(shí) TNBS灌腸造?？梢?/p>