藏藥珠嘎質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及其混淆品相關(guān)研究.pdf

1、藏醫(yī)用傘形科植物白亮獨(dú)活Heracleum candicans Wall. ex DC.的根作珠嘎藥用，白亮獨(dú)活植物形態(tài)與《晶珠本草》等書(shū)對(duì)珠嘎的敘述相符，白亮獨(dú)活為正品入藥。珠嘎具有殺蟲(chóng)，止血，愈瘡癰，治麻風(fēng)等功效。
　　通過(guò)課題組于四川省甘孜州、阿壩州調(diào)查，發(fā)現(xiàn)白亮獨(dú)活療效好，資源豐富。因此對(duì)白亮獨(dú)活藥材進(jìn)行深入研究和開(kāi)發(fā)具有重要意義。到目前為止，國(guó)內(nèi)外對(duì)白亮獨(dú)活的研究甚少，沒(méi)有相關(guān)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究。通過(guò)同期調(diào)查發(fā)現(xiàn)一種來(lái)源于傘

2、形科獨(dú)活屬植物康定獨(dú)活Heracleum souliei de Boiss.的干燥根常混入珠嘎藥用，造成用藥的混亂，對(duì)臨床用藥的安全性造成了影響。本研究以四川省食品藥品檢驗(yàn)所的科研課題“四川省藏藥材標(biāo)準(zhǔn)制定”所要求的目標(biāo)為基礎(chǔ)，完成白亮獨(dú)活質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的同時(shí)，包括對(duì)不同產(chǎn)地白亮獨(dú)活藥材的性狀、鑒別、檢查、浸出物、含量測(cè)定及藥理學(xué)進(jìn)行了研究，為白亮獨(dú)活藥材的質(zhì)量評(píng)價(jià)提供科學(xué)依據(jù)，并從原植物形態(tài)、性狀、鑒別、含量測(cè)定及藥理學(xué)對(duì)兩種獨(dú)活進(jìn)行對(duì)比研

3、究。具體研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下：
　　對(duì)白亮獨(dú)活及康定獨(dú)活藥材性狀特征進(jìn)行了鑒定。以根的顏色、形狀、斷面、氣味為主要特征。比較兩種獨(dú)活其主要區(qū)別在于根的顏色及氣味。
　　對(duì)白亮獨(dú)活藥材“鑒別項(xiàng)”進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。按照2010版《中華人民共和國(guó)藥典》附錄方法建立了其薄層鑒別、HPLC指紋圖譜鑒別方法。薄層鑒別以歐前胡素為對(duì)照品，點(diǎn)樣量4μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G板或GF254薄層板上，展開(kāi)劑石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯（7:3），1

4、0批白亮獨(dú)活藥材在硅膠G板或GF254板對(duì)應(yīng)位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)。HPLC指紋圖譜鑒別以佛手柑內(nèi)酯、歐前胡素為對(duì)照品，采用Diamonil C18色譜柱(250×4.6 mm，5μm)，流動(dòng)相為A為水，B為甲醇，梯度洗脫：35％B保持5 min、35%-95%B保持55 min、95%B保持5 min，柱溫為30℃，流速為1 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為302 nm，檢視時(shí)間65 min，進(jìn)樣量20μL，結(jié)果建立了白亮獨(dú)活藥材的HPLC指

5、紋圖譜共有模式，共有11個(gè)特征峰；白亮獨(dú)活藥材指紋圖譜峰與對(duì)照指紋圖譜峰的相似度均大于0.9，相似性好。用已建立的白亮獨(dú)活藥材薄層鑒別、HPLC指紋圖譜鑒別方法對(duì)兩種獨(dú)活進(jìn)行對(duì)比研究，結(jié)果兩種獨(dú)活差異大，能較好的鑒別。
　　對(duì)白亮獨(dú)活藥材“檢查項(xiàng)”進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。按2010年版《中國(guó)藥典》一部附錄項(xiàng)下方法，對(duì)10批不同批次白亮獨(dú)活樣品進(jìn)行了水分、總灰分、酸不溶性灰分的檢查。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，擬定了白亮獨(dú)活樣品的限量標(biāo)準(zhǔn)：水分不得超過(guò)12

6、.0%；總灰分不得超過(guò)8.0%；酸不溶性總灰分不得超過(guò)2.0%。
　　對(duì)白亮獨(dú)活藥材“浸出物含量”進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。按2010年版《中國(guó)藥典》一部附錄項(xiàng)下方法，以30%乙醇熱浸法對(duì)10批不同批次白亮獨(dú)活樣品進(jìn)行了浸出物的測(cè)定。擬定浸出物含量不得少于28%。
　　對(duì)白亮獨(dú)活“含量測(cè)定項(xiàng)”進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。分別建立了總香豆素及兩種活性成分含量測(cè)定方法。以UV-VIS在290 nm下測(cè)定吸光度，按干燥品計(jì)算，含總香豆素以補(bǔ)骨脂素含量計(jì)范圍

7、2.29~4.76％（平均值為3.40%）。擬定總香豆素含量不得少于2.5%。同時(shí)建立了康定獨(dú)活中總香豆素含量測(cè)定方法，按干燥品計(jì)算，含總香豆素以補(bǔ)骨脂素含量計(jì)范圍0.62~2.53％（平均值為1.53%）。結(jié)果：兩者含量差異大。用高效液相色譜法，條件同HPLC指紋圖譜建立方法，測(cè)定了白亮獨(dú)活中佛手柑內(nèi)酯、歐前胡素2個(gè)活性成分的含量分別為0.12%、0.71%。同時(shí)建立了康定獨(dú)活中補(bǔ)骨脂素、佛手柑內(nèi)酯2個(gè)活性成分的含量測(cè)定方法，結(jié)果補(bǔ)骨

8、脂素、佛手柑內(nèi)酯2個(gè)活性成分的含量分別為0.08%、0.12%。比較兩種獨(dú)活，均含有佛手柑內(nèi)酯，含量相同。但白亮獨(dú)活中不含補(bǔ)骨脂素；康定獨(dú)活中含極微量歐前胡素。
　　對(duì)兩種獨(dú)活進(jìn)行了急性毒性、止血、抗炎、鎮(zhèn)痛藥理實(shí)驗(yàn)研究。結(jié)果表明白亮獨(dú)活和康定獨(dú)活小鼠灌胃MTD為17.8 g/kg和16.8 g/kg，最大耐受量分別約為成人用量的118倍和112倍；白亮獨(dú)活和康定獨(dú)活高、中、低劑量對(duì)降低二甲苯致小鼠耳廓腫脹度有作用趨勢(shì)；康定獨(dú)活高

9、、中、低劑量能明顯降低小鼠扭體次數(shù)，白亮獨(dú)活高、中、低沒(méi)顯著性差異，但有趨勢(shì)；白亮獨(dú)活高、中劑量和康定獨(dú)活高劑量能顯著縮短凝血時(shí)間。
　　對(duì)兩種獨(dú)活進(jìn)行了原植物對(duì)比研究，發(fā)現(xiàn)兩種獨(dú)活原植物區(qū)別主要集中在果實(shí)、葉。
　　對(duì)兩種獨(dú)活進(jìn)行了化學(xué)成分預(yù)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明均含有香豆素、揮發(fā)油、多糖、有機(jī)酸等成分。
　　對(duì)兩種獨(dú)活中揮發(fā)油進(jìn)行了GC-MS分析。結(jié)果表明兩種獨(dú)活揮發(fā)油成分不盡一致。
　　通過(guò)對(duì)珠嘎（白亮獨(dú)活）的質(zhì)量