冷凍分離技術(shù)制備同型半胱氨酸質(zhì)控品及其性能評價.pdf

1、目的：
　　合格的質(zhì)控品是臨床實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的基礎(chǔ)和保證，針對目前臨床上同型半胱氨酸質(zhì)控品難以獲取的現(xiàn)狀，本研究旨在探索一種利用實(shí)驗(yàn)室剩余混合血清，采用冷凍分離技術(shù)制備同型半胱氨酸質(zhì)控品的方法，以獲得高、低不同濃度水平的同型半胱氨酸質(zhì)控品，并對該質(zhì)控品進(jìn)行綜合性能評價。
　　方法：
　　1、質(zhì)控品的研制：①收集臨床實(shí)驗(yàn)室傳染性項(xiàng)目篩查合格的血清樣品。②根據(jù)冷凍分離技術(shù)原理對血清冷凍時間、冷凍溫度和冷凍分離次數(shù)等因素進(jìn)行

2、分析研究，以選擇合適的冷凍分離方法獲得理想的高、低不同同型半胱氨酸濃度水平的血清樣品。③分別對疊氮鈉、乙二醇、丙三醇三種質(zhì)控品添加劑進(jìn)行性能測試，篩選出最理想的質(zhì)控品添加劑進(jìn)行質(zhì)控品制備。④將制備的質(zhì)控品用0.2um的無菌過濾器過濾并對其進(jìn)行無菌檢測。⑤以方便、適用、經(jīng)濟(jì)原則對常用分裝容器進(jìn)行篩選，使用篩選出的容器對制備質(zhì)控品進(jìn)行分裝。
　　2、自制質(zhì)控品的評價：(1)參照中國衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心《臨床實(shí)驗(yàn)室定量測定室內(nèi)質(zhì)量控制工作

3、指南》的相關(guān)要求對制備物的一般性狀進(jìn)行評價。(2)參照中國合格評定國家認(rèn)可委員會 CNAS-GL03《能力驗(yàn)證樣品均勻性和穩(wěn)定性評價指南》對制備物的均勻性和穩(wěn)定性進(jìn)行評價。①均勻性評價:每批制備物隨機(jī)抽取10支進(jìn)行檢測,每支重復(fù)檢測2次,檢測結(jié)果進(jìn)行單因素方差分析。②穩(wěn)定性評價:按照不同時間間隔,每批制備物隨機(jī)抽取6支質(zhì)控品進(jìn)行檢測,每支重復(fù)檢測2次,檢測結(jié)果進(jìn)行t檢驗(yàn)分析。
　　3、自制質(zhì)控品的臨床應(yīng)用驗(yàn)證：將制備物試應(yīng)用于Mi

4、ndray BS800全自動生化分析儀Hcy檢測的室內(nèi)質(zhì)量控制，持續(xù)檢測三個月，同時檢測進(jìn)口朗道質(zhì)控品作為比較。
　　結(jié)果：
　　1、質(zhì)控品的研制：①根據(jù)HIV、HCV、 HBsAg、梅毒的傳染性篩查結(jié)果，總計(jì)1600份血清樣品有69份被排除，收集余下的1531份血清標(biāo)本混合作為質(zhì)控品制備原料。②冷凍分離的研究結(jié)果顯示在冷凍溫度為-20℃，冷凍時間為24 h的情況下，將正常血清樣品經(jīng)多次重復(fù)冷凍分離，能夠獲得理想的高、低不同

5、同型半胱氨酸濃度水平的血清樣品。③對三種添加劑分別進(jìn)行不精密度、開瓶穩(wěn)定性和儲存穩(wěn)定性檢測，結(jié)果顯示乙二醇的綜合性能要優(yōu)于丙三醇和疊氮鈉，本研究首選乙二醇作為添加劑。④制備物細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果顯示均無細(xì)菌生長。⑤綜合考慮各方面因素后選用2ML硼硅酸鹽西林瓶作為分裝容器。
　　2、自制質(zhì)控品的評價：(1)制備物的一般性狀符合要求。(2)均勻性和穩(wěn)定性評價：①均勻性評價結(jié)果顯示,制備物的樣品內(nèi)和樣品間檢測結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）

6、。②穩(wěn)定性評價結(jié)果顯示,制備物的穩(wěn)定期大于12個月，各樣品間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　3、自制質(zhì)控品的臨床應(yīng)用驗(yàn)證:制備物在Mindray BS800上三個月內(nèi)每次檢測的結(jié)果均在均值士3S范圍之內(nèi),所有檢測結(jié)果均符合Westgard質(zhì)控規(guī)則要求。和朗道質(zhì)控品比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05)。
　　結(jié)論：
　　1、利用實(shí)驗(yàn)室剩余混合血清，采用冷凍分離技術(shù)能夠制備出高、低不同濃度的同型半胱氨酸質(zhì)控品。<