5-氨基乙酰丙酸介導(dǎo)光動(dòng)力治療大鼠甲狀旁腺功能亢進(jìn)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景與目的:
　　甲狀旁腺功能亢進(jìn)癥(hyperparathyroidism)一般分為原發(fā)性(Primaryhyperparathyroidism，PHPT)、繼發(fā)性（secondary hyperparathyroidism，SHPT）、三發(fā)性（tertiary hyperparathyroidism，3HPT）三種類型，其共同特征是甲狀旁腺激素（parathyroid hormone，PTH）的合成和分泌過多。對(duì)大部分繼發(fā)于甲

2、狀旁腺(parathyroidgland，PTG)增生所致的甲狀旁腺功能亢進(jìn)癥來(lái)說(shuō)，其治療以甲狀旁腺切除術(shù)(parathyroidectomy)最為有效。手術(shù)治療往往需要比較嚴(yán)格的適應(yīng)癥或部分患者不愿意接受手術(shù)而使其應(yīng)用受到限制。對(duì)于多發(fā)或非典型腺瘤者，術(shù)中被遺漏或切除相對(duì)不足等時(shí)有發(fā)生，而切除過多則可導(dǎo)致術(shù)后持久性的低鈣血癥，甚至發(fā)生永久性甲狀旁腺功能減低（hypoparathyroidism）的可能。近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的微創(chuàng)手術(shù)，雖然具

3、有創(chuàng)傷性小、耐受性好、術(shù)后甲旁減發(fā)生率低等優(yōu)點(diǎn)，但其適應(yīng)人群僅限于單個(gè)腺瘤的患者。
　　光動(dòng)力治療（photodynamic therapy，PDT）是近年來(lái)興起的一種基于光化學(xué)反應(yīng)的新療法。其基本原理是利用光敏劑在某些特定組織中的差異性高濃度蓄積，在氧的存在下，經(jīng)特定波長(zhǎng)（630nm）光的照射后，生成活性氧(reactive oxygen species，ROS)，進(jìn)而產(chǎn)生一系列氧化產(chǎn)物誘導(dǎo)細(xì)胞死亡，從而達(dá)到治療腫瘤等病變組織的

4、目的。其相比于傳統(tǒng)手術(shù)、放療或化療，具有適應(yīng)癥廣、特異性高、副作用少等優(yōu)點(diǎn)，目前已廣泛應(yīng)用于各種腫瘤、皮膚病、甚至感染性疾病的治療當(dāng)中。已有研究表明，將光敏劑5-氨基乙酰丙酸（5-aminolevulinic acid，5-ALA）注射入大鼠或人體內(nèi)后，其中間代謝產(chǎn)物原卟啉Ⅸ（ProtoporphyrinⅨ，PpⅨ）（光敏物質(zhì)）在正?；蛟錾募谞钆韵俳M織中具有與周圍組織相比更高濃度的蓄積。但是否能產(chǎn)生光動(dòng)力效應(yīng)，目前仍不清楚。
　

5、　本研究旨在分析5-ALA介導(dǎo)PpⅨ在大鼠甲狀旁腺及其周圍組織當(dāng)中的分布特點(diǎn)，明確5-ALA所介導(dǎo)的光動(dòng)力療法(5-ALA PDT)作用于正常大鼠甲狀旁腺的安全性與有效性，并嘗試將5-ALA PDT應(yīng)用于繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)癥(SHPT)大鼠模型的治療中。
　　方法:
　　1、將5-ALA注射入大鼠腹腔后切取甲狀旁腺(PTG)、甲狀腺(TG)及周圍肌肉組織，分別測(cè)定其內(nèi)的PpⅨ濃度進(jìn)行比較，同時(shí)明確PpⅨ濃度與5-ALA注

6、射劑量及作用時(shí)間之間的關(guān)系;
　　2、按光敏劑劑量和光照時(shí)間進(jìn)行隨機(jī)分組，手術(shù)暴露PTG及其周圍組織后行光動(dòng)力照射，檢測(cè)照射前后血清甲狀旁腺激素(PTH)、總鈣(Ca)、三碘甲狀腺原氨酸(T3)、甲狀腺素(T4)、促甲狀腺素(TSH)水平，并觀察各組織形態(tài)學(xué)上的變化。
　　3、通過5/6腎切除結(jié)合高磷飼養(yǎng)制備SHPT大鼠模型后分多次對(duì)其行PDT照射，并比較每次照射前后血清PTH水平的變化。
　　結(jié)果:
　　1、在

7、各時(shí)間點(diǎn)上檢測(cè)到PTG內(nèi)PpⅨ濃度均高于TG及周圍肌肉組織(p＜0.05);PTG內(nèi)PpⅨ濃度隨5-ALA作用時(shí)間逐漸升高，在1.5h檢測(cè)到最大值（77.38±8.92）ug/g，之后開始逐漸下降，PTG內(nèi)PpⅨ濃度隨5-ALA注射劑量增加而逐漸升高(p＜0.05)，當(dāng)5-ALA注射劑量由400mg/kg增加到600mg/kg時(shí)，PTG內(nèi)PpⅨ含量仍有所上升，但差異已無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05);
　　2、單獨(dú)使用光敏劑或光照對(duì)P

8、TG功能無(wú)影響，在PDT照射0.25d后即檢測(cè)到血清PTH、總Ca顯著下降(p＜0.05)，而照射前后血清T3、T4、TSH始終無(wú)明顯改變(p＞0.05)。PDT照射后血清PTH水平隨5-ALA注射劑量的增加、光照時(shí)間延長(zhǎng)而降低，與對(duì)照組（0mg/kg，0min）相比差異顯著(p＜0.05);組織學(xué)檢查顯示PDT照射后PTG組織包膜仍完整，但主細(xì)胞明顯減少，脂肪細(xì)胞增多，TG與周圍肌肉組織未見到明顯變化。
　　3、5/6腎切除結(jié)合

9、高磷飼養(yǎng)28天后大鼠血清Cr、PTH水平明顯高于手術(shù)前(p＜0.05)，SHPT模型大鼠經(jīng)多次PDT照射后的血清PTH水平隨照射次數(shù)的增加而降低，經(jīng)PDT（100mg/kg，10min）照射3次后的PTH水平與手術(shù)前比較已無(wú)顯著差異(p＞0.05)。
　　結(jié)論:
　　1、5-ALA介導(dǎo)PpⅨ在大鼠PTG內(nèi)的蓄積濃度明顯高于周圍組織，并與5-ALA注射劑量及作用時(shí)間相關(guān);
　　2、5-ALA PDT可對(duì)正常大鼠PTG的組