骨髓單個(gè)核細(xì)胞移植對大鼠脊髓全橫斷后nestin和Synapsin I表達(dá)的影響.pdf

1、目的：探討同種異體骨髓單個(gè)核細(xì)胞（bone marrow mononuclear cells，BMMNCs）移植入脊髓全橫斷損傷大鼠對損傷脊髓組織局部微環(huán)境中巢蛋白（nestin）和突觸素Ⅰ（Synapsin I）表達(dá)的影響及意義。
　　方法：100只清潔級Wistar大鼠（雌雄不限）隨機(jī)取96只分為三組：正常對照組32只：切除相應(yīng)的椎板不損傷脊髓；模型組32只：建立脊髓全橫斷模型；細(xì)胞移植組32只：建立脊髓全橫斷模型后，給予骨髓

2、單個(gè)核細(xì)胞（BMMNCs）移植治療。各組大鼠分別于不同時(shí)間段(3d、1w、2w、4 w)利用免疫組織化學(xué)技術(shù)和RT-PCR檢測脊髓組織中nestin與Synapsin I的表達(dá)變化，利用MIAS-2000圖像處理系統(tǒng)分析觀察nestin和Synapsin I的陽性產(chǎn)物在脊髓的分布，并測量陽性產(chǎn)物的光密度值。采用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù)，組間比較,方差齊者采用完全隨機(jī)設(shè)計(jì)資料的方差分析，樣本間的兩兩比較用q檢驗(yàn)；方差不齊者用成組設(shè)計(jì)多

3、個(gè)樣本比較的秩和檢驗(yàn)(Kruskal-Wallis法)，樣本間兩兩比較的秩和檢驗(yàn)(Nemenyi法)；P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.01為有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：⑴BBB評分顯示術(shù)后正常對照組在各時(shí)間點(diǎn)的BBB脊髓功能評分未見明顯變化，屬評分正常；細(xì)胞移植組和模型對照組都有恢復(fù)過程，其中細(xì)胞移植組較模型對照組的大鼠恢復(fù)較好，但均未達(dá)到正常組水平；術(shù)后4周時(shí)細(xì)胞移植組BBB評分較模型對照組增加顯著，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意

4、義（P﹤0.05）。⑵免疫組織化學(xué)染色、RT-PCR及圖像處理系統(tǒng)分析顯示模型對照組在傷后約3d可見損傷區(qū)域附近nestin表達(dá)升高，2w達(dá)高峰，4w后nestin表達(dá)明顯下調(diào)；細(xì)胞移植組在脊髓傷3d可見損傷區(qū)域附近nestin表達(dá)升高，1w達(dá)高峰，4w后nestin表達(dá)明顯下調(diào)，且各時(shí)期與正常對照組、模型對照組相比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）。細(xì)胞移植組與模型對照組Synapsin I在損傷3d后可見表達(dá)，1w、2w和4w的表達(dá)量