高山離子芥鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因編碼序列的克隆及其抗氧化作用的分析.pdf

1、高山離子芥(Chorispora bungeana Fish＆C.A.Mey)是一種稀有的高山冰緣植物，具有很強(qiáng)的抗寒能力，是研究植物適應(yīng)冷凍環(huán)境機(jī)制的理想材料。本文以高山離子芥為實(shí)驗(yàn)材料，克隆了一個(gè)鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因(CbIRT)，并且在不同溫度(4℃、O℃和-4℃)和不同鐵濃度(0uM、200uM和500uM)對其處理下，系統(tǒng)的檢測了抗氧化系統(tǒng)和CbIRT基因的表達(dá)響應(yīng)。 鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(iron transport protein

2、，IRT)是具有跨膜運(yùn)輸離子功能的特殊蛋白質(zhì)，屬于金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)家族的成員.本研究運(yùn)用RACE方法從高山離子芥中克隆得到完整的鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的cDNA，命名為CbIRT(基因登錄號為EU330924)。該基因全長1290bp，包含一個(gè)1035bp的開放閱讀框(ORF)，編碼344個(gè)氨基酸的蛋白.系統(tǒng)進(jìn)化樹分析顯示該基因與擬南芥AtIRT1和遏藍(lán)菜TcIRT-G的親緣關(guān)系最近，同源性分別達(dá)到了87.4％和86.5％，而在氨基酸序列水平與擬南芥A

3、tIRT1的同源性達(dá)到了89％，表明克隆得到的CbIRT屬于金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)體家族成員。實(shí)時(shí)熒光定量方法對高山離子芥CbIRT基因在不同溫度和鐵營養(yǎng)水平條件下的表達(dá)情況進(jìn)行分析表明，CbIRT對零下低溫和零上低溫的表達(dá)水平呈截然不同的反應(yīng)：正常鐵營養(yǎng)狀態(tài)下CbIRT是微量表達(dá)的，而缺鐵及低溫處理都可以大幅度地促進(jìn)該基因的表達(dá)，富鐵可以抑制該基因的表達(dá).顯示了該蛋白在轉(zhuǎn)運(yùn)Fe離子方面的重要作用。 在低溫處理過程中我們還發(fā)現(xiàn)高山離子芥抗