腦側枝循環(huán)重建及交感神經對其影響的實驗研究.pdf

1、背景:
　　腦血管狹窄或閉塞導致的灌注不足是缺血性卒中和血管性癡呆的直接原因之一。近年來，隨著老齡化的加重，缺血性卒中和血管性癡呆的發(fā)生率在我國均呈現(xiàn)上升趨勢，嚴重威脅人們的身心健康。此類患者的治療效果在很大程度上依賴于側枝循環(huán)代償，如果腦缺血時能盡快促進側枝循環(huán)形成，將對缺血組織的保護和其后神經功能的恢復有重要意義。腦血管狹窄或閉塞時側枝循環(huán)開放，但往往不能維持正常的灌注，此時，機體能通過啟動側枝血管重建（動脈生成和血管生成）來

2、提供額外的血流，這也是目前促進側枝循環(huán)重建成為研究的關鍵點和熱點的原因。
　　雖然目前關于腦側枝循環(huán)建立的研究較多，在動物研究中，學者們多采用不同的組合方式結扎單側或雙側的頸總動脈和椎動脈，研究低灌注時側枝動脈生成及腦循環(huán)儲備能力和腦血流量的變化規(guī)律。然而腦動脈狹窄是一個漸進性發(fā)展的過程，上述模型難以模擬腦動脈狹窄時腦血流量漸進性下降的病理生理過程。因此，建立一個腦血流量漸進性下降的動物模型研究側枝循環(huán)重建的發(fā)生發(fā)展規(guī)律尤為必要。

3、同時，大量關于外周血管的研究已提示，血管周圍神經對動脈生成和血管生成的進程影響較大，而低灌注時交感神經對腦側枝循環(huán)重建有何影響未知。如果能從這方面著手，研究腦血管管周交感神經調控的關鍵環(huán)節(jié)，尋找特異性靶向分子，探索出加快腦側枝循環(huán)重建的方法，無疑將對缺血腦組織的保護和其后神經功能的恢復有重要意義。
　　因此，本研究一方面通過分次栓塞腦動脈建立犬腦漸進性低灌注模型，探討側枝循環(huán)建立的過程、時間及程度，為臨床治療時間窗提供理論依據(jù);另

4、一方面，通過結扎大鼠一側頸總動脈，觀察去除同側交感神經對腦動脈側枝循環(huán)重建的影響，為進一步研究交感神經對腦側枝循環(huán)重建的調控打下基礎。
　　目的:
　　第一部分 犬腦漸進性低灌注時腦側枝循環(huán)重建的實驗研究
　　通過分次栓塞犬左、右椎動脈及左、右頸內動脈建立犬腦漸進性低灌注模型
　　1.探討分次栓塞腦動脈，犬腦血流量的變化規(guī)律及其與腦血管側枝循環(huán)重建的相互關系;
　　2.探討時間對犬腦循環(huán)重建程度的影響及其與

5、腦組織影像學改變及神經功能變化的相互關系。
　　第二部分 低灌注時去除交感神經對大鼠腦側枝循環(huán)重建的影響
　　1.探討腦低灌注時，去除交感神經對大鼠軟腦膜吻合支與Willis動脈環(huán)直徑及管壁重塑的影響;
　　2.探討腦低灌注時，去除交感神經對大鼠腦再缺血時腦血流量(cerebral bloodflow，CBF)、腦梗死體積及神經功能的影響。
　　方法:
　　第一部分:
　　1.18只成年雜種犬隨機數(shù)字

6、表法分為ABCD4組，分次或同時栓塞左右側椎動脈和左右側頸內動脈，A組為正常對照組(n=3)，B組為隔1 w栓塞組(n=5)，C組為隔2w栓塞組(n=5)，D組為同時栓塞組(n=5)。
　　2.采用MRI灌注成像檢測每次栓塞后犬腦血流量的變化。
　　3.采用MRI或CT檢測每次栓塞后犬腦組織影像學改變。
　　4.采用DSA來觀察每次栓塞前、后犬腦血管側枝循環(huán)的建立情況。
　　5.整體行為分類法(OPC)評定每次栓

7、塞后犬神經功能損傷程度。
　　第二部分:
　　1.84只健康的成年雄性SD大鼠用隨機數(shù)字表法分為動脈結扎+去神經組（聯(lián)合組）、動脈結扎組、去神經組和假手術組（每組21只）。每組又分為3個亞組(A、B、C)，每個亞組7只。
　　2.結扎大鼠一側頸總動脈建立腦低灌注模型;
　　3.A亞組大鼠行乳膠灌注觀察右側軟腦膜吻合支與Willis動脈環(huán)直徑。
　　4.B亞組大鼠行免疫組化染色觀察右側軟腦膜吻合支管徑厚度。<

8、br>　　5.C亞組大鼠8周后行右側大腦中動脈永久性阻塞(permanent middle cerebralartery occlusion，pMCAO)，采用LDF檢測右側大腦中動脈區(qū)域腦皮層血流量;24h后參照Zea Longa評分標準評估神經功能缺損情況;行TTC染色檢測腦梗死體積。
　　結果:
　　第一部分:
　　1.腦血流量變化:D組腦血流量急劇下降;B、C兩組栓塞過程中腦血流量呈漸進性下降，完全栓塞后腦血流

9、量始逐漸增加，8周時恢復。C組腦血流量下降程度較B組輕。
　　2.腦血管影像學:分次栓塞左右側椎動脈，B組和C組可見頸內動脈擴張、腦底動脈環(huán)側枝開放，未見側枝血管生長;再分次栓塞左右側頸內動脈，B組和C組均有側枝血管生長，C組更明顯;8周時復查兩組側枝血管明顯增多、管徑增粗。
　　3.腦組織影像學:D組見多發(fā)性梗死灶或（和）大面積腦梗死;B組見個別動物呈現(xiàn)基底節(jié)區(qū)梗死，C組未見明顯梗死灶。
　　4.神經損傷程度: A組

10、1級;B組1只犬2級，余1級;C組1級;D組5級，所有動物在術后2.5～8 h死亡。
　　第二部分:
　　1.腦血管直徑變化:大鼠聯(lián)合組右側軟腦膜吻合支直徑明顯小于動脈結扎組，大于去神經組和假手術組;聯(lián)合組右側Willis動脈環(huán)直徑明顯小于動脈結扎組。
　　2.腦血管管壁厚度:大鼠聯(lián)合組右側軟腦膜吻合支管壁厚度小于動脈結扎組，大于去神經組和假手術組。
　　3.永久性大腦中動脈阻塞試驗:聯(lián)合組顯示大腦中動脈區(qū)的腦血

11、流值與基線值的比值小于動脈結扎組;神經行為學評分結果顯示聯(lián)合組評分大于動脈結扎組; TTC染色顯示聯(lián)合組腦梗死體積百分率大于動脈結扎組。
　　結論:
　　1.分次栓塞腦頸內動與椎動脈，犬腦血流量漸進性下降，完全栓塞后腦血流量始逐漸增加，8周時恢復;側枝動脈生成可以完全重建腦循環(huán)，恢復腦循環(huán)儲備，重建過程需時8周;犬腦循環(huán)重建的程度與重建時間密切相關，側枝動脈生成需時大約2周才能重建充分有效的側枝循環(huán)。
　　2.腦低灌注