藤三七通過(guò)Keap1-Nrf2途徑緩解高果糖飲食所致肝細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是最常見(jiàn)的肝臟疾病之一。氧化應(yīng)激是其發(fā)生肝臟結(jié)構(gòu)損傷的主要原因之一。Nrf2存在于各種細(xì)胞中，研究表明它在肝臟疾病中發(fā)揮改善機(jī)體氧化應(yīng)激水平、減輕肝臟炎癥、對(duì)抗肝細(xì)胞凋亡等作用。但其確切作用機(jī)制并不完全清楚。藤三七是一種藥食同源植物，中醫(yī)學(xué)認(rèn)為其具有滋補(bǔ)強(qiáng)壯、消腫止痛的功效。近年來(lái)有研究表明藤三七具有降糖、降脂、抗肥胖的作用。本實(shí)驗(yàn)擬研究藤三七對(duì)高果糖所誘導(dǎo)的大鼠NAFLD的保護(hù)作用及其機(jī)制。

2、>　　方法:本實(shí)驗(yàn)以SD大鼠及HepG2細(xì)胞作為研究對(duì)象。用HE染色法檢測(cè)高果糖及藤三七飲食對(duì)大鼠肝臟形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響;用TUNEL熒光染色法檢測(cè)高果糖及藤三七作用于大鼠肝臟及HepG2細(xì)胞后，對(duì)肝臟細(xì)胞凋亡的影響;用蛋白免疫印跡法(Western blot)檢測(cè)大鼠肝臟組織中Keap1、Nrf2、Bax、Bcl-2蛋白表達(dá)量的變化及HepG2細(xì)胞中Bax、Bcl-2蛋白表達(dá)量的變化;用四甲基偶氮唑鹽微量酶反應(yīng)比色法(MTT)檢測(cè)不同劑量

3、果糖及藤三七作用于HepG2細(xì)胞對(duì)其存活率的影響;RNA干擾法及TUNEL熒光染色法檢測(cè)藤三七對(duì)HepG2細(xì)胞凋亡的影響;實(shí)驗(yàn)結(jié)果用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果:高果糖飲食可誘導(dǎo)大鼠肝臟發(fā)生脂肪病變，藤三七對(duì)高果糖飲食所誘導(dǎo)的大鼠肝臟脂肪病變有明顯抑制作用;高果糖飲食可誘導(dǎo)大鼠肝臟內(nèi)MDA的增加，藤三七可以減少高果糖飲食所誘導(dǎo)的肝臟內(nèi)MDA的產(chǎn)生;高果糖飲食可誘導(dǎo)大鼠肝臟細(xì)胞凋亡，藤三七可以減少高果糖飲食所誘導(dǎo)