蓽拔酰胺構(gòu)效關(guān)系及作用機(jī)制研究與Keap1-Nrf2小分子抑制劑優(yōu)化設(shè)計(jì).pdf

1、一、蓽拔酰胺衍生物的設(shè)計(jì)、合成及抗腫瘤作用機(jī)制研究
　　蓽拔酰胺是提取自天然植物體蓽拔中的生物堿，具有多種藥理活性。其最大特點(diǎn)是對(duì)多種腫瘤細(xì)胞具有良好的細(xì)胞毒性，而對(duì)正常細(xì)胞則無(wú)影響，并且可以提高某些化學(xué)治療藥的抗腫瘤療效。
　　近年來(lái)，化學(xué)生物學(xué)方法在尋找新化合物的作用靶標(biāo)中應(yīng)用越來(lái)越廣泛。活性導(dǎo)向的小分子探針(Activity-based probes，ABPs)技術(shù)則是近些年發(fā)展起來(lái)的研究蛋白質(zhì)功能的新技術(shù)，多功能小分

2、子探針能在復(fù)雜的生物樣品中特異性地標(biāo)記處于作用狀態(tài)下的靶標(biāo)蛋白，使得對(duì)這些活性蛋白的分離、鑒定、分布、功能等研究成為可能。
　　本論文第一部分根據(jù)本課題組擴(kuò)環(huán)得到的活性優(yōu)良蓽拔酰胺衍生物PL-51，設(shè)計(jì)合成了一類七元內(nèi)酰胺環(huán)蓽拔酰胺衍生物30個(gè)，體外抗腫瘤活性測(cè)試顯示大部分衍生物都基本保持了與PL-51和蓽拔酰胺相當(dāng)?shù)幕钚?，特別是化合物P15和P18對(duì)六種腫瘤細(xì)胞株都表現(xiàn)出了優(yōu)于蓽拔酰胺的活性，IC50值達(dá)到納摩爾級(jí)別，構(gòu)效關(guān)系研

3、究表明苯環(huán)上單取代的化合物活性優(yōu)于雙取代和三取代化合物，小基團(tuán)取代優(yōu)于大基團(tuán)取代。
　　本課題組前期得到一個(gè)體外抗腫瘤活性優(yōu)良的蓽拔酰胺衍生物PL-23，進(jìn)行作用機(jī)制驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)，它并不像蓽拔酰胺通過(guò)提高腫瘤細(xì)胞內(nèi)活性氧水平發(fā)揮作用，常見(jiàn)的相關(guān)激酶也不是其作用靶標(biāo)。因此利用小分子探針技術(shù)對(duì)蓽拔酰胺衍生物PL-23進(jìn)行作用靶標(biāo)的尋找，設(shè)計(jì)合成了活性探針ZM76和兩個(gè)非活性探針ZM77、ZM78，明確了蛋白分子量為40 kDa處為靶蛋白條

4、帶，通過(guò)初步的質(zhì)譜分析，得到了兩個(gè)得分最高的潛在靶標(biāo)蛋白Annexin A1和Annexin A2。
　　二、Keap1-Nrf2小分子抑制劑優(yōu)化設(shè)計(jì)
　　Keap1-Nrf2-ARE信號(hào)通路在抗腫瘤、抗炎等氧化應(yīng)激相關(guān)疾病發(fā)揮重要作用，Nrf2是細(xì)胞內(nèi)重要的轉(zhuǎn)錄激動(dòng)劑，受Keap1的負(fù)反饋調(diào)控，氧化應(yīng)激環(huán)境下，Nrf2解離入核，與抗氧化應(yīng)答因子ARE結(jié)合，誘導(dǎo)一系列保護(hù)蛋白表達(dá)，而高活性的Keap1-Nrf2蛋白相互作用小