越婢湯對DI大鼠膀胱ICCs中HCN通道表達的研究.pdf

1、研究背景：
　　小兒遺尿癥指5歲或5歲以上小兒夜間不能從睡眠中醒來而發(fā)生的無意識排尿，是目前嚴重威脅兒童身心健康的疾病之一。目前本病的發(fā)病機制尚不明確，但國內(nèi)外的研究方向主要集中于逼尿肌不穩(wěn)定，現(xiàn)在大多認為逼尿肌不穩(wěn)定與膀胱Cajal間質(zhì)細胞有著密切的關(guān)系。在對膀胱興奮性表達的研究方面，HCN通道作為膀胱 ICCs細胞中產(chǎn)生過度激活正離子流電流的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)，HCN通道蛋白表達的增加或減少都會直接引起起搏細胞的興奮性改變，對于膀胱細胞

2、興奮性的維持和調(diào)節(jié)可能具有關(guān)鍵性的作用。我們在前期的臨床觀察中發(fā)現(xiàn)宣肺法治療小兒遺尿癥療效肯定，為了研究宣肺法治療小兒遺尿的科學內(nèi)涵，故本研究以越婢湯為干預方劑，以膀胱ICC樣細胞作為靶點，探討宣肺法對遺尿癥不穩(wěn)定膀胱模型的可能作用機制
　　研究目的：
　　本研究旨在從細胞、分子水平闡明逼尿肌不穩(wěn)定的可能作用機制，并對中醫(yī)宣肺法治療遺尿作出現(xiàn)代實驗科學的論證。
　　研究方法：
　　將 wistar大鼠分為膀胱出口

3、梗阻手術(shù)組和假手術(shù)組，6周后行尿動力檢查篩選出手術(shù)組膀胱逼尿肌不穩(wěn)定大鼠和假手術(shù)組膀胱逼尿肌穩(wěn)定大鼠進行研究。將手術(shù)組分為越婢湯組、縮泉丸對照組、模型對照組，加上假手術(shù)組共4組，每組10-13只大鼠。給藥2周后觀察各組變化。用免疫熒光染色法、平均光密度測定檢測膀胱ICCS細胞含量及HCN蛋白含量，并做出數(shù)據(jù)處理分析，從膀胱興奮性表達的角度探討越婢湯對膀胱逼尿肌不穩(wěn)定的可能作用機制。
　　研究結(jié)果：
　　1.造模結(jié)果：手術(shù)6周

4、后，經(jīng)尿動力學檢測儀進行充盈性膀胱測壓檢測，假手術(shù)組 DI發(fā)生率為16.7％（2/12）；手術(shù)組70只，死亡13只，DI發(fā)生率為71.9%（41/57）。
　　2.宏觀療效：與模型組相比，假手術(shù)組大鼠膀胱濕重明顯降低，具有非常顯著的統(tǒng)計學意義（P<0.01），與模型對照組相比，越婢湯組大鼠膀胱濕重明顯減輕，具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　3.藥物對膀胱ICCs細胞及HCN蛋白表達的影響：與模型對照組相比，假手術(shù)組大鼠膀