附子水溶性生物堿治療急性心力衰竭的實驗研究.pdf

1、目的：研究附子水溶性生物堿對急性心力衰竭的治療作用。
　　實驗方法：①對健康的成年大鼠采用左心室插管的方法監(jiān)控其心率與心室內壓，并以靜脈注射普羅帕酮制作急性心力衰竭模型，造模成功后，分別對各組大鼠進行給藥：陽性組給予參麥注射液（6.67mL/kg）、模型組給予蒸餾水0.1mL/kg、給藥組給予附子水溶性生物堿（1.25×10-3g/kg，2.50×10-3g/kg，5.00×10-3g/kg）。記錄其造模前后與給藥后5、10、20

2、、30、60min的HR、+dp/dtmax及-dp/dtmax值的變化。另取一批大鼠，以相同方式進行急性急性心力衰竭造模給藥，給藥20min后對各組大鼠進行股靜脈采血，并用酶聯(lián)免疫法（Elisa）測定其血清中各細胞因子（TNF-α、Ang-Ⅰ、Ang-Ⅱ、BNP、ANP、ALD）的含量水平及其活性變化。②原代培養(yǎng)心肌細胞（以差速貼壁為純化方法），除正常組細胞不予處理外，其余組別細胞通過給予戊巴比妥鈉（濃度0.8％）對細胞進行造模，造模

3、成功后給藥：模型組（同體積無血清培養(yǎng)基）、陽性組（去乙酰毛花苷4mL/L）、給藥組（附子水溶性生物堿0.01g/L，0.02g/L，0.04g/L）。藥物與細胞作用90min后，對其進行染色，于顯微鏡下觀察其形態(tài)并記錄。再直接將各濃度附子水溶性生物堿與正常心肌細胞作用，90min后，測定細胞的活力以及相關細胞因子、離子的濃度與ATP酶的活性。另取一批細胞，除正常組細胞不予處理外，其余組別細胞通過給予戊巴比妥鈉（濃度0.8%）對細胞進行造

4、模，造模成功后給藥：模型組（同體積無血清培養(yǎng)基）、陽性組（去乙酰毛花苷4mL/L）、給藥組（附子水溶性生物堿0.01g/L，0.02g/L，0.04g/L）。藥物與細胞作用90min后，測定心肌細胞活力以及相關細胞因子濃度、ATP酶的活性與相關的離子濃度。
　　結果：①用普羅帕酮造模之后的大鼠，HR與+dp/dtmax出現(xiàn)下降，而-dp/dtmax值則顯著升高，附子水溶性生物堿1.25×10-3、2.50×10-3、5.00×10

5、-3g/kg靜脈給藥后，可有效升高模型大鼠的HR和+dp/dtmax，降低-dp/dtmax。給藥后，血清中Ang-Ⅰ、Ang-Ⅱ、ANP、BNP、ALD、TNF-α等指標均有所降低。②正常心肌細胞通過戊巴比妥鈉造成急性心力衰竭模型后，搏動減弱或消失，且胞形態(tài)也發(fā)生了明顯改變，并有細絲狀的觸角伸出，部分細胞形狀變圓。陽性組與附子水溶性生物堿組細胞形態(tài)大多有所恢復，且絲狀觸角明顯減少。附子水溶性生物堿各劑量均有降低正常心肌細胞Na+、Ca

6、2+含量以及升高正常心肌細胞K+含量的作用，且各劑量組均能使Ca2+-Mg2+-ATP酶、Ca2+-ATP酶與Na+-K+-ATP酶的活性提高。經戊巴比妥鈉造模后的心肌細胞，其膜上Na+-K+-ATP酶的活性增高，而Ca2+-ATP酶與Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性出現(xiàn)降低，細胞內Ca2+、K+的濃度升高，Na+與Mg2+的濃度下降；陽性藥與附子水溶性生物堿各劑量給藥后，急性心力衰竭模型細胞活力顯著提高，且Na+與Mg2+的濃度與C

7、a2+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性均有所升高，Ca2+、K+的含量與Na+-K+-ATP酶的活性則有所降低，其對急性心力衰竭細胞模型的作用趨勢和強心苷類藥物相仿。
　　結論：附子水溶性生物堿對急性心力衰竭大鼠模型以及急性心力衰竭細胞模型都具有改善作用；能調節(jié)HR、+dp/dtmax、-dp/dtmax使之趨于正常水平，并可調節(jié)動物體內與急性心力衰竭相關的細胞因子；還能提高心肌細胞的活力、調節(jié)心肌細胞內與急性心力衰