多發(fā)性內分泌腺腫瘤綜合征1型的臨床表型和基因突變研究.pdf

1、研究背景及目的:
　　多發(fā)性內分泌腺腫瘤綜合征1型(MENl; OMIM131100)，又稱為Werner綜合征，為一種常染色體顯性遺傳病，以發(fā)生垂體前葉、甲狀旁腺、胃腸道及胰腺腫瘤為特征。MEN1基因位于11號染色體長臂(llq13)，全長9KB，包含10個外顯子。第2-10號外顯子編碼一個包含610個氨基酸的menin蛋白，該蛋白在細胞分裂、基因組穩(wěn)定性及細胞轉錄中起重要調控作用，屬腫瘤抑制因子，故MEN1基因突變可使meni

2、n蛋白缺失或者功能障礙而致全身多處內分泌腫瘤發(fā)生。本研究通過對3例臨床診斷為MEN1的患者及其中1例患者的一級親屬進行MEN1基因測序，明確并探討:1.研究對象是否有MEN1突變及突變類型;2.探討MEN1基因型與臨床表型的關系，同時對MEN1基因突變陰性的患者，篩查RET、CDKNlB、CDC75等相關基因突變情況，以進一步了解MEN的遺傳學發(fā)生機制;3.確定MENl家系，盡早發(fā)現(xiàn)家系中的突變患者并給予治療或者隨訪。
　　研究對

3、象及方法:
　　一、研究對象
　　MEN1患者3例及其中1例患者的一級親屬（患者的父母兄）3名:先證者A存在胰島素瘤、垂體微腺瘤及甲狀旁腺功能亢進，臨床診斷為多發(fā)性內分泌腺瘤1型，
　　并經手術證實胰島素瘤診斷;先證者B存在原發(fā)性醛固酮增多癥（腎上腺腺瘤）、原發(fā)性甲狀旁腺功能亢進、高泌乳素血癥，臨床診斷為多發(fā)性內分泌腺腫瘤綜合征1型，術后證實前兩項診斷;先證者C存在垂體ACTH瘤、胰島細胞瘤，臨床診斷為多發(fā)性內分泌腺腫

4、瘤綜合征1型。
　　二、研究方法
　　抽取先證者A（MEN1患者）及其父母兄和先證者B、先證者C的外周抗凝血5ML，采用標準的酚/氯仿抽提法提取人血白細胞基因組DNA。
　　運用聚合酶鏈式反應(PCR)、DNA測序分析技術及MLPA技術檢測MEN1基因的2-10外顯子，應用sequencing anaLysis5.2軟件輸入測序結果，查看LOR值、raw data、BC status、PP status，并與NCBI及

5、MEN1基因庫對比。
　　運用MiSeq高通量測序平臺進行RET、CDKNlB、CDC75等基因位點的篩查。
　　研究結果:
　　1.先證者A及其父親均發(fā)現(xiàn)MEN1基因突變，位于第7號外顯子上第984位的核苷酸發(fā)生了C＞A的雜合突變（見圖3-1），導致終止密碼子UAA提前出現(xiàn)，menin截短，從而導致多發(fā)性內分泌腺瘤的發(fā)生，經過NCBI及MEN1基因庫查詢發(fā)現(xiàn)該突變位點國內已有報道，患者母親及大哥MEN1基因檢測均未見

6、異常。
　　2.先證者B、C均未發(fā)現(xiàn)MEN1基因突變，并給予先證者A進一步篩查RET、CDKNlB、CDC75等相關基因，均未發(fā)現(xiàn)突變位點。
　　研究結論:
　　1.臨床表現(xiàn)為胰島細胞瘤、甲狀旁腺瘤、垂體瘤的先證者A其MEN1基因發(fā)生了c.984C＞A(p.Y328*)突變，為MEN1致病基因突變類型之一。
　　2.臨床表現(xiàn)為甲狀旁腺瘤、垂體瘤、腎上腺瘤的先證者B和臨床表現(xiàn)為垂體瘤、胰島細胞瘤的先證者C的遺傳學病