集胞藻PCC6803基因slr0280調(diào)控機(jī)制的研究.pdf

1、隨著分子生物學(xué)和分子遺傳學(xué)研究的發(fā)展，特別是重組DNA技術(shù)的廣泛應(yīng)用，藍(lán)藻分子遺傳學(xué)取得了許多成就。其中集胞藻（Synechocystis sp.）PCC6803是一種具有天然DNA轉(zhuǎn)化系統(tǒng)的單細(xì)胞藍(lán)藻，它既能利用光能進(jìn)行自養(yǎng)生長，也能利用葡萄糖進(jìn)行異養(yǎng)生長，是光合作用分子生物學(xué)研究的重要模式之一。
　　 在本研究中，PCR擴(kuò)增了藍(lán)細(xì)菌集胞藻6803（Synechocystis sp. PCC6803）中功能未知的基因slr02

2、80，進(jìn)一步以pBluescript SK(+)為載體將其克隆到大腸桿菌中，構(gòu)建了pBlue-0280質(zhì)粒。再通過DNA體外重組，以卡那霉素抗性基因完全取代slr0280基因片段，構(gòu)建了攜帶選擇性標(biāo)記的卡那霉素抗性的pBlue-0280-kana質(zhì)粒。該質(zhì)粒轉(zhuǎn)化野生型集胞藻6803細(xì)胞，獲得了能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上正常生長的slr0280基因缺失突變株。對該突變株基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，驗(yàn)證其基因結(jié)構(gòu)的正確性。
　　 從生

3、理曲線，藻膽蛋白、葉綠素a的含量和光合放氧速率及光照強(qiáng)度，外源葡萄糖，鹽濃度梯度對藻的生長的影響，常溫光譜及低溫?zé)晒夤庾V等幾個(gè)方面對突變株進(jìn)行了探究。突變株細(xì)胞生長速度較野生型細(xì)胞慢，胞內(nèi)的葉綠素及藻膽蛋白的含量比野生型偏低，表明該突變株的光合效率有所下降。在有外源葡萄糖存在的條件下，突變株生長狀況比野生型的好，說明此突變株比較適合混養(yǎng)生長。低溫?zé)晒夤庾V顯示，slr0280基因的缺失，并未對光合作用過程能量的傳遞造成很大影響，其功能有待