集胞藻synechocystissp.pcc6803溶血素的分離純化和初步鑒定

1、中國海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文集胞藻Synechocystis sp.PCC6803溶血素的分離純化和初步鑒定姓名：劉云章申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：細(xì)胞生物學(xué)指導(dǎo)教師：汝少國;王蔚20070701S e p h a c r y l S - 3 0 0 H i g h R e s o l u t i o n 凝膠過濾層析和羥基磷灰石層析等步驟進(jìn)行了分離純化，也獲得了分子量為8 1 k D a 的蛋白質(zhì)，但通過溶血實(shí)驗(yàn)檢測不到明顯的溶血活性。我們推

2、測有可能是因?yàn)榧? 8 0 3w T 菌株的溶血素在細(xì)胞內(nèi)以無活性的形式存在，只有分泌到細(xì)胞外，經(jīng)過某種構(gòu)象變化或修飾之后才會形成具有活性的形式。改變培養(yǎng)基的組成，對集胞藻6 8 0 3 溶血素的分泌有較大影響。培養(yǎng)基中不同濃度的C a 2 + 對集胞藻6 8 0 3 細(xì)胞的生長無顯著影響，但在不含c a ：2 + 的培養(yǎng)基中生長的集胞藻6 8 0 3 僅有極低的溶血活性，S D S ．P A G E 結(jié)果也幾乎看不到溶血素條帶。而

3、在2 倍C a 2 + ( O ．4 8 m M ) 的培養(yǎng)基中生長的集胞藻6 8 0 3 溶血活性顯著高于對照( 0 ．2 4 m Mc a 2 + ) ，說明溶血素的分泌對培養(yǎng)基中的C a 2 + 存在依賴性。當(dāng)培養(yǎng)基中缺乏K 、P 元素或未逶無菌空氣培養(yǎng)時(shí)，集胞藻6 8 0 3 的生長和溶血活性都顯著降低，溶血活性的降低的原因可能是細(xì)胞數(shù)量的減少導(dǎo)致溶血素分泌量的減少。培養(yǎng)基中添加1 0 9 M M n 2 + 、F e 3 +