擴張型心肌病差異蛋白表達及蛋白生物標志物研究.pdf

1、擴張型心肌病(dilated cardiomyopathy，DCM)是原發(fā)性心肌病(primary cardiomyopathy，PCM)中最常見的一種類型，其病因和發(fā)病機制尚不明確，主要特征為左心室（多數(shù)）和（或）右心室擴大和心肌收縮功能障礙，伴或不伴有心律失常、充血性心力衰竭，可并發(fā)栓塞甚至猝死等[1-7]，是導致慢性心力衰竭的主要病因之一。有文獻報道，在我國DCM的發(fā)病率為13/10萬～84/10萬，男性多于女性(2.5∶1)，其

2、中，家族性擴張型心肌病(family dilatedcardiomyopathy，F(xiàn)DCM)占2.25％～8.8％[5]，發(fā)病以青壯年較為多見，65歲以上老年人發(fā)病率為1％[7]。DCM患者如能及時得到診斷治療，患者將在很大程度上減少相應的醫(yī)療費用以及致命性事件的發(fā)生。然而，由于DCM仍缺乏特異性的診斷指標，截至目前，DCM的早期診斷仍缺乏敏感特異、方便快捷的診斷方法，其診斷主要根據(jù)患者的臨床表現(xiàn)以及X線檢查、心電圖(electroca

3、rdiogram，ECG)檢查、超聲心動圖檢查等相關輔助檢查等情況，做出的排除性診斷，即需要排除風濕性心臟病、高血壓性心臟病、繼發(fā)性心肌病、冠心病、先天性心臟病、心肌炎、克山病(Keshan disease，KD)等有關疾病后才能診斷DCM。
　　近年來，蛋白質組學領域的研究取得了突飛猛進的發(fā)展，技術日趨成熟[8-10]。目前，通過應用蛋白質組學相關技術已在腫瘤[11-13]、骨關節(jié)病[14-15]等患者的組織液和組織中尋找到相應

4、的蛋白生物標志物，為腫瘤、骨關節(jié)病等相關疾病的診斷和鑒別診斷提供了準確可靠、方便快捷的新方法。然而，迄今為止，還沒有利用新近發(fā)展的蛋白質組學技術從DCM、KD等心肌病患者血清中尋找到相關的血清蛋白生物標志物的準確報道。為此，我們進行了DCM患者、KD患者以及健康人血清蛋白生物標志物的研究，期望通過應用蛋白質組學技術，篩選出DCM的血清蛋白生物標志物，建立DCM診斷以及鑒別診斷的判別模型。
　　目的:
　　通過應用蛋白質組學技

5、術尋找DCM血清蛋白生物標志物，建立DCM診斷以及鑒別診斷的判別模型，為DCM的診斷、鑒別診斷，提供新的、方便快捷的方法，為DCM的早期發(fā)現(xiàn)、早期預防、早期診斷以及早期治療開拓新的途徑。
　　方法:
　　選擇在山東大學齊魯醫(yī)院、濟南市中心醫(yī)院和濟南市第一人民醫(yī)院心內科住院的29例DCM患者作為DCM組;選擇內蒙古、山東及四川等3省份（自治區(qū)）KD病區(qū)的32例慢型KD患者作為KD組;并以濟南市當?shù)亟】等?0例作為健康對照組。取

6、受檢者血清，應用液體芯片飛行時間質譜技術(ClinProtTM MALDI-TOF-MS)檢測受檢者血清差異蛋白，使用ClinProTools2.2獲取蛋白峰數(shù)據(jù)，并采用遺傳、快速分類和神經網(wǎng)絡等3種算法篩選血清生物標志物，建立ClinPrott判別模型。
　　結果:
　　①經檢測DCM組、健康對照組2組受試對象的血清樣本，共獲得蛋白質/多肽有效峰圖73個，其中有57個差異蛋白/多肽，與健康對照組比較，DCM組有35個差異蛋

7、白/多肽上調，22個差異蛋白/多肽下調。篩選出質荷比(mass-to-charge ratio, m/z)值為4247.95、4209.37、1058.69、1074.78、2364.71的5個蛋白質/多肽作為血清生物標志物，經驗證ClinPrott判別模型的敏感性與特異性分別為99.14％、99.16％。
　?、诮洐z測DCM組、KD組等2組受試對象的血清樣本，共獲得蛋白質/多肽有效峰圖61個，其中有49個差異蛋白/多肽，與KD組

8、比較，DCM組有22個差異蛋白/多肽上調，27個差異蛋白/多肽下調。篩選出質荷比(m/z)值為4049.27、3947.99、7927.06、1450.35、5917.11的5個蛋白質/多肽作為血清生物標志物，經驗證ClinPrott判別模型的敏感性與特異性分別為99.17％、99.19％。
　　結論:
　?、貲CM患者與健康人群比較，DCM患者血清蛋白差異表達;篩選出的質荷比(m/z)為4247.95、4209.37、10