我國中華白蛉的鑒別和分子群體遺傳結構研究.pdf

1、中華白蛉(Phlebotomus chinensis Newstead，1843)隸屬毛蠓科(Psychodidae)、白蛉亞科(Phlebotominae)、白蛉屬(Phlebotomus)。中華白蛉在我國的分布廣泛，是其分布區(qū)利什曼病的重要傳播媒介。多年的研究證實中華白蛉在不同地理分布區(qū)，其形態(tài)特征、生態(tài)習性和傳病能力存在一定差異，具有相當?shù)膹碗s性，部分地區(qū)其分類地位存疑多年。有鑒于此，深入探討中華白蛉的分類地位和群體遺傳結構具有重

2、要意義。
　　 本課題的研究策略如下：首先，在我國中華白蛉的分布地，廣泛收集樣本；然后，應用形態(tài)特征與分子特征相結合的方法，對應分類鑒別中華白蛉及其他蛉種，并探討中華白蛉的分類地位；其次，篩選中華白蛉具有多態(tài)性的微衛(wèi)星DNA位點，描述其基本特征；再者，應用mtDNA-Cytb基因和多態(tài)微衛(wèi)星DNA位點兩個分子標志，闡明我國中華白蛉不同群體間的基因交流、基因漸滲、遺傳差異程度以及群體分化等問題，并分析影響群體遺傳結構的主要因素。取

3、得如下主要結果：
　　 1.本研究獲得我國河南、陜西、四川和甘肅4省6個地點的中華白蛉樣本，涵蓋不同的地理環(huán)境、生態(tài)習性、海拔高度和疾病流行區(qū)。采集獲得模式產地(四川九寨溝，海拔2000m以上)的四川白蛉，以及新疆的吳氏白蛉和長管白蛉。
　　 2.檢視了來自不同采集地中華白蛉132只、四川白蛉26只、吳氏白蛉29只，以及長管白蛉23只。吳氏白蛉和長管白蛉具有典型的形態(tài)鑒別特征，而中華白蛉與四川白蛉的差異主要體現(xiàn)在翅長，及

4、其雄蛉與雌蛉的翅長度比例。
　　 3.對應形態(tài)鑒別確認的中華白蛉、四川白蛉和吳氏白蛉，單蛉抽提基因組DNA，擴增和測定rDNA-ITS2和mtDNA-Cytb序列。序列比對結果顯示，ITS2序列在中華白蛉、四川白蛉和吳氏白蛉種間缺乏解析度，Cytb序列的種間解析度比ITS2理想。中華白蛉與四川白蛉的分子特征已具有一定明顯差別，且中華白蛉種內也出現(xiàn)遺傳分化。提示目前將四川白蛉暫列為獨立種較為合理，四川白蛉與中華白蛉的親緣關系非常近

5、，四川白蛉應處于獨立種的分化中(speciation)。
　　 4.在已測定的中華白蛉微衛(wèi)星DNA的154個陽性克隆序列中，獲得有效的微衛(wèi)星DNA序列共118條。在此基礎上，選擇了22個位點進行多態(tài)性篩選，共獲得了多態(tài)的微衛(wèi)星DNA位點14個。同時，對其中的10個位點做了基因掃描，描述了各位點的基本特征。
　　 5.應用mtDNA-Cytb基因和10個微衛(wèi)星DNA位點研究了中華白蛉的群體遺傳結構，兩種分子標志的研究結果均

6、顯示：來自河南群體的中華白蛉遺傳分化程度最高，陜西的兩個群體間FST為負值，其間差異極小，總體趨勢是基因流水平隨著地理距離的增大而減小，群體遺傳分布格局符合距離隔離模型。但基于Cytb基因序列的結果顯示基因流水平為0.0594，群體間分化水平高，其間遺傳差異程度與地理距離密切相關；基于微衛(wèi)星DNA的結果是群體間分化水平低，基因流為6.599，其間遺傳差異程度與種的分化密切相關，也與地理距離存在一定相關性。導致上述差異的原因是兩種分子標志