T-bet和Eomes在射頻消融激活的抗腫瘤免疫應(yīng)答中的作用.pdf

1、目的：探討轉(zhuǎn)錄因子 T-bet(T-box expressed in T cells)和 Eomes(Eomesodermìn)在射頻消融(Radiofrequency ablation，RFA)激發(fā)的抗腫瘤免疫應(yīng)答中的作用。
　　方法：在 C57BL/6小鼠雙側(cè)背部對(duì)稱的種植B16黑色素瘤細(xì)胞株，對(duì)右側(cè)腫瘤進(jìn)行RFA治療，3天后取右側(cè)腫瘤組織行免疫組織化學(xué)染色觀察分析；流式細(xì)胞術(shù)分析左側(cè)腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞亞群比例與數(shù)量；實(shí)時(shí)熒光定

2、量聚合酶鏈反應(yīng)（Real-time PCR)檢測(cè)細(xì)胞因子及轉(zhuǎn)錄因子的mRNA表達(dá)水平；流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)T-bet和 Eomes在 T細(xì)胞與自然殺傷細(xì)胞(Natuml killer cellNK細(xì)胞)中的表達(dá)；其后分別建立T-betY(TKO)、Eomes7_(EKO)與野生型C57BL/6小鼠RFA治療模型，比較各組小鼠左側(cè)腫瘤生長曲線與小鼠生存時(shí)間。
　　結(jié)果：RFA治療抑制消融區(qū)外腫瘤生長，治療組小鼠腫瘤生長較對(duì)照組慢，小鼠生存

3、時(shí)間較對(duì)照組延長；RFA治療組小鼠左側(cè)腫瘤內(nèi)CD45+免疫細(xì)胞總數(shù)，以及CD4+、CD8+、NK與 CD4+FoxP3_細(xì)胞浸潤數(shù)量顯著增加，CD4+FoxP3+數(shù)量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；RFA組白細(xì)胞介素2(Interleukin-2 IL-2)、干擾素-y(Interferon-y正N-y)、腫瘤壞死因子-a(Tumor necrosis factor-a T N F-a)等細(xì)胞因子以及轉(zhuǎn)錄因子T-bet、EomesmRNA表達(dá)水平上調(diào)